实验十一离体蛙心灌流一、;;+、K+、Ca2+肾上腺素(Adr)、乙酰胆碱(Ach)、基本原理心肌具有自动节律性收缩活动的特性,离体心脏用理化性质近似于血浆的生理溶液(任氏液)进行灌流,以保持其新陈代谢顺利进行,这种节律性可维持较长时间。心脏正常节律性活动有赖于内环境理化因素的相对稳定,所以改变灌流液成分,则可引起心脏活动的改变。三、动物和器材蟾蜍斯氏蛙心套管、常用手术器械、棉线、蛙心夹、套管夹、张力换能器、生理实验系统、蜡盘、滴管、培养皿、任氏液、%NaCl溶液、5%NaCl溶液、2%CaCl2溶液、1%KCl溶液、1:5000肾上腺素溶液、1:10000乙酰胆碱溶液、肝素生理盐水四、方法和步骤1、双毁髓2、暴露心脏3、辨认血管和心脏4、灌流2、用斯氏蛙心套管法制备离体蛙心1)在左主动脉下穿一线,离远心端结扎;再在左右主动脉下穿一线,打活结备用。 2)蛙心插管内预放一定的肝素任氏液。3)在左主动脉上剪一小囗,将蛙心插管缓缓插入,在穿过主动脉囗时要在心脏收缩期插入(?),注意不要太深(?),如果出现插管内液面上下移动表示插管成功,稳住插管,提起备用线,连同插管扎紧,并固定在上面的玻璃钩上。2、用斯氏蛙心套管法制备离体蛙心4)用任氏液冲洗管内血液。5)轻轻翘起插管和心脏,在下面穿一总线,认清静脉窦的位置,远离静脉窦结扎,结扎时逐渐用力,保持心脏正常跳动,如出现停博,松线再将线外移(?)。6)再洗血液,直到无色。3、连接仪器并记录正常心搏曲线1)用蛙心夹在心脏舒张期夹住心尖部,蛙心夹上的系线与换能器相连。2)启动PCLAB—UE,将换能器信号输入CH1。3)记录正常的收缩曲线,注意心脏的收与缩和记录波形上与下的关系。
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