犬猫弓形虫病分析.ppt

犬猫弓形虫病分析
宠医053 谢娇
指导老师张斌
江苏畜牧兽医职业技术学院
摘要
本文通过对上海爽佳宠物诊所41例临床病例(主要为犬、猫)进行随机抽取血液样本以提取血清,用层析法-弓形虫IgM试纸条进行免疫检测,通过对检测线的识别来判别检测其为阳性或阴性。分析检测结果来统计家养犬、猫的弓形虫感染情况,结果表面有41%的宠物携带弓形虫,对人畜危害较大。
关键词
弓形虫检测犬猫
绪论
弓形虫病(toxoplasmosis)又称弓形体病,是由龚地弓形虫引起的人畜共患病。在动物体内多为隐性感染,主要侵犯眼、脑、心、肝、淋巴结等。可引发广泛的临床症状,如弓形虫性脑炎、弓形虫视网膜炎、弓形虫性腹膜炎等。
传统的弓形虫检查方法如镜检、滋养体分离法、卵囊分离法等费时、费力,且其特异性和敏感性不高,常常导致漏诊或错误的诊断;分子生物学诊断技术虽然具有较高的敏感性和特异性,但由于其操作复杂或实验条件要求较高,难以推广应用;免疫学诊断方法是进行弓形虫感染调查、临床弓形虫病筛选诊断的常规方法,具有敏感性高、特异性强、操作简便快速等优点,所以免疫学方法仍是目前弓形虫感染和弓形虫病的主要诊断手段。
1. 材料与方法
血清:临床随机抽取犬与猫的血液样本来提取
弓形虫抗体试剂盒:该试剂盒由杭州科彤畜牧兽医研究所、杭州亨力动物医院总经销,试剂盒置2-8℃可保存数月,可常温运输,不可冷冻
10ul微量移液枪、5ML注射器、冰箱
计时器:检测时计算试剂与样本的反应时间

。准备好抽血所要用到的酒精棉球、橡皮带等工具材料。

先用注射器抽取可疑临床病例的前或后肢静脉血液2~3ML,于试管中,放入离心机中离心2000r/min,10min。离心机分离出血清(无溶血),生理盐水作1比1稀释血清后使用,或置冰箱待用。

(1)检测前将待检血清样本从冰箱取出,在室温或37℃恒温箱中平衡10分钟。
(2)将试剂盒置室温静置数分钟。
(3)检测前将检测卡,试剂,样本和对照品平衡至室温(15-30℃)。
(4)检测卡放置于洁净的水平面上。
(5)检测卡上矩形检测窗口底部蓝带下面的样本膜区加10ul样本液。需将样本完全润湿膜区(这会使固定化抗原最大限度保证捕捉到抗体,增强检测的特异灵敏度)。
检测所用到的10ul吸液管使用说明:压挤吸液管上部,然后释放吸液,确保吸液水平线恰在黑色标志处。接触至装置样本区域的膜上,轻轻释放出液体使之全部被加入到膜上。
(6)垂直滴加试剂满3滴(100-120ul/滴)到试剂孔
(7)5-10分钟读取结果。
2 结果
统计了上海爽佳宠物诊所2007年1月至2008年3月期间就诊的宠物犬、猫病例41例,从检测结果分析,有41%的犬、猫感染弓形虫,感染率较高,对人和宠物危害较大。
3 分析与讨论
弓形虫属顶端复合物亚门、孢子虫纲、真球虫目,细胞内寄生性原虫。其生活史中出现5种形态,即滋养体(速殖子);包囊(可长期存活于组织内),呈圆形或椭圆形、直径10~200μm、破裂后可释出缓殖子、裂殖体;配子体和卵囊。前3期为无性生殖,后2期为有性生殖。弓形虫生活史的完成需双宿主:在终宿主(猫与猫科动物)体内,上述5种形成俱存。卵囊随动物粪便排出,在适宜温度(24℃)和湿度环境中,约经2~4天发育成熟,抵抗力强,可存活1年以上,如被中间宿主吞入,则进入小肠后子孢子穿过肠壁,随血液或淋巴循环进入全身各组织细胞内以纵二分裂法进行增殖。