发酵实验报告.docx

实验报告
实验名称：与酵母菌发酵
所属课程名称：发酵工程工艺原理
班级：2011级生物技术
组长：
组员：
—
实验指导教师：黄循吟
海南师范大学生命科学学院
2013年12月5日

蒸馏水、酒精
四．实验步骤与方法
1. 酵母菌种的分离：
分离培养基制备与灭菌：称鲜豆芽100g，放入烧杯中，加水1000ml，煮沸30min，用纱布过滤，用水补足原量，再加入葡萄糖50g，琼脂20g，煮沸溶化，分装三角瓶和试管，包扎，在121℃下灭菌20分钟。
菌种的保存: 取酵母粉1g，加10ml无菌水制成菌悬液，并按梯度10﹣1、10-2、10-3进行稀释。，在28℃培养48小时，挑单菌落于斜面试管在28℃培养48小时，备用。
2. 菌种扩大培养：
用接种环挑两环保存在斜面试管上的菌种，放入150ml的三角瓶(每瓶含有75ml的种子培养液)中进行扩大培养，150r/min,28℃摇瓶培养48小时。
3. 发酵培养：
将扩大培养后的菌液按10%的接种量接到250ml的三角瓶中进行摇床培养，即取20ml菌种液置于200ml的种子培养液中，150r/min,28℃培养48小时，同扩大培养一样，每三个小时取一次样，测其吸光度值、pH值和菌种数量。
，绘制曲线：
以时间为横坐标，分别以菌液浓度，pH，OD值为纵坐标作图。
：
发酵完毕，取出摇瓶内培养基装入离心管，离心分离，得湿酵母烘干，称干重，计算得率。
1. 扩培过程数据结果
每3小时记录一次扩培过程中菌液的pH值、OD505、菌液浓度，结果如表1：
表1 扩培过程各参数值
时间
扩配时间
h
温度℃
OD505
菌液浓度
（个/ml）
pH值
转速
r/min
取样
mL
01:00
3
28

×104

150
10
04:00
6
28

×106

150
10
07:00
9
28

×107

150
10
10:00
12
28

×107

150
10
13:00
15
28

×107

150
10
16:00
18
28

×107

150
10
19:00
22:00
01:00
04:00
07:00
10:00
13:00
16:00
19:00
22:00
21
24
27
30
33
36
39
42
45
48
28
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