老鹳草总黄酮提取工艺与其生物活性的分析研究.pdf

摘要摘要老鹤草是我国常用中药材,始见于明代兰茂的《滇南本草》,后清代赵学敏收录到《本草纲目拾遗》中,性辛、苦、平,归肝、肾、脾经,具有祛风湿、通经络、强筋骨、止泄痢疾等作用。现代药理学研究老鹳草主要含黄***类、鞣质类、挥发油类和有机酸类四大类成分,其药理作用主要有抗病毒、抗氧化、止泻痢、抗炎镇痛、降血糖、保肝护肾等,经研究其主要有效成分为黄***类成分,现代临床用于治疗肝脏疾病、抗病毒等方面有较好的疗效,但是在兽医临床上的应用及研究报道还很少。本项目的目的是通过对老鹳草光谱学分析、有效成分含量的测定来初步建立老鹳草的指纹图谱,并且确定其药用部位和采收时期,在此基础上研究其保肝、抗病毒和免疫增强作用。主要完成了老鹳草的光谱学分析,老鹳草总黄***(TFG) 的提取和不同部位、不同月份含量的比较及微量元素测定,老鹤草对小鼠急性肝损伤的保护性试验及其抗病毒作用和免疫增强作用等四个方面的研究。为了建立老鹳草初步的指纹图谱,我们通过紫外、红外测定药物不同溶剂提取物和不同时期的扫描光谱,为本药评价标准的制定提供了基础。测定结果表明, 用水和甲醇作溶剂提取液的紫外光谱具有特征性指纹图谱,不同时期采收的本药的紫外和红外扫描图谱也具有特征性的指纹图谱,可以作为老鹳草的鉴定依据。为了能够更有效的提取老鹳草中的有效成分TFG,我们进行了正交试验,测定了老鹳草不同部位和不同时期采收的药材中TFG和各种微量元素的含量。结果显示,50%乙醇浓度,液料比15:1,温度90℃,时间6 h为最佳提取方案;老鹳草根中TFG含量较高;5月份全草中TFG含量要高于6月份。因此建议以TFG为主要药用成分的老鹳草采收,以5月份的带根全草为佳。通过微量元素的测定, 发现老鹳草中含有丰富的各种微量元素,从而佐证了其有良好的药理学作用和营养价值。为了进一步证明和探讨老鹳草的保肝作用及其机理,我们进行了老鹳草对小摘要 n一鼠急性肝损伤的保护性试验,经组织切片和肝功能相关的AST、ALT、LDH、SOD、ⅧA等观察,分析其保肝作用的机理。结果显示,老鹳草高剂量(1咖L, /只)情况下具有明显保护四***化碳造成的肝损伤,且证实其作用机理与老鹳草提高抗氧化能力和清除自由基的能力有着密切的联系。为了探索老鹳草的抗病毒作用,在鸡胚内测定了老鹳草对NDV、AⅣ和IBDV 的作用,鸡体内测试了老鹳草对体液免疫和细胞免疫的影响。结果显示,老鹳草对NDV和AIV均一定的预防作用, 并且对感染NDV的鸡胚有一定的治疗和体外抑制病毒的作用;对IBD则没有明显的防治作用;对体液免疫和细胞免疫均有一定程度的提高,这可能是其对部分病毒病有预防作用的机理。以上试验结果表明:通过紫外和红外光谱扫描可以对老鹳草进行初步鉴定, 建立了老鹳草的指纹图谱;通过本试验建立的TFG提取方法可以提高老鹳草中的 TFG提取效率;明确了老鹳草的采收时期和药用部位;证实了老鹳草有一定护肝作用,其机理与抗氧化、清除自由基的能力有关;对NDV、越V有一定的抑制作用,但对IBD没有明显防治作用,并具有提高体液免疫和细胞免疫的作用。关键词:老鹳草;指纹图谱;总黄***;肝保护;抗病毒英文摘要Ⅳ-_-__---_-___-__I_l___--__--_____●●-___●___l●______-__--_--__-●___’_____●l__—●________-_●--__-●____-_●__●-__-●__一一 Abstract GP阳刀f“聊w蜘砌f朋-a耐肌.,aS acom如on CIlinese herbal medicine,waS firSt desc舶edd嘶ng Ming Dynasty by Lan Mao iIl<Dian NaIlBenCao>,也en、ⅣaS indexed in<A Supplement pendi啪of MateriaMedica>by Zha0 Xuemin iIlQ吨 DynaS何Its navour ishasaCrid,bi他r andsmooth,and enters liver,虹dney andspleen includecle撕ng challnelsmeridialls,strengmening me bones andmuscles,aIlti-di撕heal,and painrelie访ng efrect on t0 modem phamlac0109ical rese2Lrch,也e iIl&,.册f姗2 are naVonoid, talmills,V0latileoils,;脚c