口服葡萄糖耐量试验.ppt

口服葡萄糖耐量实验(OGTT)实验目的与要求目的要求掌握酶法测定血清葡萄糖浓度的原理掌握血糖变化的临床生理意义掌握口服葡萄糖耐量试验的原理,适用人群和临床意义。口服葡萄糖耐量试验(OGTT)是一种葡萄糖负荷试验,用于检查人体胰岛素B细胞功能和机体对糖的调节能力。正常人进食后血糖都会暂时性升高,30-60分钟后可升到最高峰,,2小时左右又会回到空腹水平。这种现象称为耐糖现象。若内分泌失调或神经系统功能紊乱,则调节功能失常,食入大量糖后血糖浓度可急剧上升,短时间不能恢复到原值,称为耐糖失常现象。所以观察耐糖现象可以了解调节血糖的各种机能是否健全。实验原理血糖的测定方法测定方法无机化学法有机化学法酶法无机化学法:Folin-Wu法,基于葡萄糖醛基的还原性Cu2+OH-Cu+Glu磷钼酸显色特异性差有机化学法:邻甲苯***法、联苯***法、氨基联苯法等邻甲苯***+Glu葡萄糖基***希夫氏碱蓝绿色化合物缩合脱水分子重排干扰因素多酶法:1、己糖激酶法(HK)2、葡萄糖氧化酶法(GOD法)血糖的测定方法1、己糖激酶法(HK法)原理:葡萄糖+ATP HK 葡萄糖-6-磷酸+ADP葡萄糖-6-磷酸+NADP+G-6-PD6-磷酸葡萄糖内酯+NADPHNADPH在340nm有吸收峰,其吸光度增加与标本中的葡萄糖浓度成正比评价:本法特异性高,灵敏度高,干扰因素少,适用于自动化分析,为葡萄糖测定的参考方法,但是试剂较贵。血糖的测定方法血糖的测定方法评价:操作简单,特异性较高,(血红蛋白)、四环素、尿酸、Vc、胆红素、GSH可引起测定结果负偏差。2、葡萄糖氧化酶法(GOD)葡萄糖+O2+H2OGOD葡萄糖酸内酯+2H2O22H2O2+4-氨基安替比林+酚POD红色醌类化合物+H2O+O2血糖的测定方法总结血糖的测定方法按测定原理可分为无机化学方法、有机化学方法和生物化学方法三类。此外,还有固相酶法、电化学法及质谱法等。常用的是分光光度法和酶学方法。分光光度法中常见的是邻甲苯***法,是利用葡萄糖在加热的有机酸溶液中与某些芳香族***类,可生成有色衍生物这一原理建立的。酶学方法有葡萄糖氧化酶法、己糖激酶法和葡萄糖脱氢酶法等。临床上OGTT主要适用情况(1)无糖尿病症状,空腹血糖异常,或偶尔出现糖尿,或有明显糖尿病家族史者(2)有糖尿病症状,血糖水平不够糖尿病诊断标准者(3)妊娠期或甲状腺功能亢进出现糖尿者(4)不明原因肾病与视网膜病者。实验器材:5mL移液管、50或100uL微量可调式移液器、721E分光光度计、1cm比色皿、37℃恒温水浴锅应用GOD-POD法测定血糖浓度来检测葡萄糖耐量