薄层色谱和柱色谱课件.ppt

、生物活性筛选30~50mg分析用标准品>100mg小批量生产>50g产业化制备>1000g采用色谱技术制备纯物质,即分离一种或多种色谱纯物质;“制备”这一概念指获得足够量的单一化合物。制备色谱和分析色谱的比较制备色谱分析色谱分离目的单位时间内获得符合纯度的物质量获得混合物中各组分的信息(定性定量)色谱模型非线性色谱线性色谱仪器设备制备柱、高流量、大进样、低检测(高通量)高压稳流、高精度进样、高灵敏检测(高重现性)(PTLC)(OPLC)(CTLC),点样,然后以合适的溶剂展开,达到分离、鉴定和定量的目的。常用TCL来表示。属于固-(分辨率)高分离快速(需十至几十分钟,同时展开多个试样)设备简单(薄层板,点样器,展开缸…)操作方便(仪器自动化,直接与检测仪连用),使其在流动相(溶剂)流过固定相(吸附剂)的过程中,连续的产生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附,从而达到各成分的互相分离的目的。(Rf)组分二组分一样品Rf的范围:0<Rf<1Rf=~(常用)Rf=~(最佳)影响Rf值的因素:(1)展开温度:室温对分离影响不明显。其他条件相同,温度低比温度高时展开慢,分离好。(2)薄层厚度:板厚度变化对比移值影响明显;,影响较小;,分离效果最佳。(3)吸附剂含水量:与吸附剂的种类、使用时的加水量、风干时间、活化温度、活化时间等因素有关。(4)层析缸中蒸气:为使缸中蒸气饱和,可以在缸内壁附上一层滤纸,让展开剂全部湿润;把展开剂放入层析缸一段时间后再放薄层板;尽可能在恒定温度下层析。(5)其他影响因素:展开剂的pH、展开时间、展开距离、样品浓度、点样量、薄层板所用吸附剂中的粘合剂的种类和用量等,都有可能影响样品组分比移值的大小。