大鼠皮层星形胶质细胞原代培养、鉴定及氧糖剥夺模型建立.doc

大鼠皮层星形胶质细胞原代培养、鉴定及氧糖剥夺模型建立.doc大鼠皮层星形胶质细胞原代培养、鉴定及氧糖剥夺模型建立作者:魏爱宣李昕华闫世军何金婷莽靖邢影邵延坤徐忠信【摘要】目的原代培养和鉴定大鼠皮层星形胶质细胞,并建立大鼠皮层星形胶质细胞氧糖剥夺(OGD)模型。方法大鼠星形胶质细胞原代培养后,作胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫细胞化学染色鉴定,应用缺氧DHank液及缺氧培养罐行OGD后用台盼蓝染色及乳酸脱氢酶(LDH)漏出率检测细胞损伤程度。结果星形胶质细胞培养至第9天,%±%;星形胶质细胞经不同时间0GD处理后,台盼蓝染色呈现不同形态;OGD60min时,星形胶质细胞LDH漏出率较对照组明显增加(P<),并随时间递增。结论成功完成大鼠皮层星形胶质细胞原代培养,星形胶质细胞在培养第9天可用于模型制备,成功建立星形胶质细胞0GD模型。【关键词】星形胶质细胞;原代培养;氧糖剥夺(0GD)[Abstract]ObjectiveToconductprimarycultureandidentificationofratcerebralcorticalastrocytes,andtosetuptheoxygen/glucosedeprivation(OGD),%±%atthe9thday;differentshapeandmotilityidentifiedbytrypanbluestainwasobservedwhenexposedtodifferentOGDtime;60minOGDcausedasignificantincreaseonthelevelsofLDHrelease(P<).,hamber.[Keywords]Astrocytes;Primaryculture;Oxygenglucosedeprivation(OGD)研究表明在缺血缺氧性脑损伤过程中,星形胶质细胞和神经元有着动态、复杂的相互作用,从而维持脑组织的正常功能和存活〔1〜3)。本实验采用大鼠皮层星形胶质细胞原代培养,应用体外氧糖剥夺(oxygenglucosedeprivation,OGD)建立大鼠脑皮层星形胶质细胞缺血缺氧损伤模型,模拟体内脑缺血过程,为今后进一步探讨缺血过程中星形胶质细胞的脑保护作用机制奠定基础。〜2d内的Wistar乳鼠,用于星形胶质细胞原代培养。购自吉林大学动物实验中心。