烟酰胺腺嘌呤二核苷酸.doc

Β-烟酰***腺嘌呤二核苷酸(β-Nicotinamideadeninedinucleotide,NAD)烟酰***腺嘌呤二核苷酸基本信息介绍也称为二磷酸吡啶核苷酸(DPN),或辅脱氢酶(codehydrogenase)I或辅酶I,是一种转递质子(更准确说是氢离子)的辅酶,它出现在细胞很多代谢反应中。NADH(更准确写法:NADH+H+)是其还原形式。CAS:53-84-9分子式:C21H27N7O14P2EINECS:-200-184-4分子量:·mol−1比旋光度:[α]23D-°(1%,水);NAD极易吸湿,储存温度-20℃。其固体在干燥器内0℃或室温时稳定;在中性或微酸性溶液(pH3~7)中,0℃时可稳定2周以上;在碱性溶液中极易变质;加热易分解。NAD溶于水(50mg/mL),不溶于***等有机溶剂;(ε17800),最小吸收波长230nm(ε8000)。NAD+是脱氢酶的辅酶,如乙醇脱氢酶(ADH),在糖酵解、糖异生、三羧酸循环及呼吸链中发挥着不可替代的作用。中间产物会将脱下的氢递给NAD,使之成为NADH+H+。而NADH+H+则会作为氢的载体,在呼吸链中通过化学渗透偶联的方式,合成ATP。NAD的氧化和还原NAD的吸光曲线在吸光方面,NADH+H+在260nm和340nm处各有一吸收峰,而NAD+则只有260nm一处吸收峰,这是区别两者的重要属性。这同时也是很多代谢试验中,测量代谢率的物理依据。*104L/(mol*cm),*10³L/(mol*cm)。制备方法目前工业中大量的烟酰***腺嘌呤二核苷酸产品主要为从酵母中提取分离获得。该过程虽然工艺成熟,但是耗费能源和材料巨大,产品昂贵,限制了的生产和其后续应用过程的开发。流程:新鲜压榨酵母è[破壁,提取]è提取液è[分离]è滤液è[一次吸附][洗脱]è一次洗脱液è[中和][二次吸附][洗脱][三次吸附][洗脱]è三次洗脱液è[沉淀][过滤][干燥]è辅酶I1、破壁、提取、分离将新鲜压榨酵母搅拌下加入等量沸水,加热至95℃保温5min,迅速加入两倍酵母质量的冰块,过滤,滤饼用水洗涤2次,合并滤液和洗液,加入强碱性季铵I型阴离子交换树脂201×7(717),搅拌16h,过滤,收集滤液。2、吸附、洗脱滤液用浓盐酸调pH=2-,经弱酸性丙烯酸系阳离子交换树脂122柱吸附,用无热原水洗至流出液澄清为止,,当流出液呈淡咖啡色,,开始收集,流出液呈淡黄色时停止,得一次洗脱液。3、中和、吸附、洗脱将强酸性苯乙烯系阳离子交换树脂001×7(732)加至洗脱液中,搅拌测pH=5-7,过滤,滤饼用无热原水洗涤,合并洗液和滤液,加稀氨水调pH值至7(约15%),再用强碱性季铵I型阴离子交换树脂201×7(717)50-60目柱进行吸附,用无热原水洗至流出液澄清无色为止。将766型活性炭60-80目柱与201×7树脂柱串联,***化钾溶液洗脱,洗脱液立即流经活性炭柱进行吸附,吸附完后解除两柱串联,用pH9的无热原水洗涤,再用pH8的4%乙醇洗涤,最后用无热原水洗至中性,用体积比为***:乙酸乙