Vero细胞培养流感病毒.pdf

作者签名:——导师:——日期:——,不包含其他人或其它结构已经发表或撰写过的研究成果。其他同志对本研究的启发和所做的贡献均已在论文中作了明确的声明并表示了谢意。作者签名本人完全了解中国协和医科大学有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权保留送交论文的复印件,允许论文被查阅和借阅:学校可以公布论文的全部或部分内容梢圆捎糜坝。跤』蚱渌粗剖侄伪存论文,保密的论文在解密后遵守此规定。中国医学科学院中国协和医科大学硕士学位论文日期
摘要中国医学科学院中国协和医科大学硕士学位论文流行性感冒是人类至今尚不能有效控制的传染病之一,其特点是在短期内突然爆发,迅速蔓延,造成不同程度的流行。除感染人外,流感病毒在动物体内也广泛存在并能引起猪、鸡、马等动物发病,导致动物的大量死亡。虽然有少数抗病毒药物对流感病毒的感染有一定疗效,但并不能完全消除流感病毒给人类造成的威胁,因此疫苗接种仍然是预防流感的有力措施。目前,С趾凸励以哺乳动物细胞为基质生产流感疫苗,本实验对付ǖ度疫苗株在细胞系上的增殖情况进行了考察,为研制以细胞为基质的流感疫苗提供了参考依据。第一部分不同类别的流感病毒毒株在细胞上的传代~年度付ǖ谋卑肭蛏鞲幸呙缢玫谋曜级局暧腥型别,本实验中,三个型别的流感病毒疫苗株被分别接种到鶹赴并在适合于流感病毒繁殖的最优化条件下进行培养,三天之后收获细胞裂解液,测定其血凝滴度,之后将第一代收获的病毒液继续接种细胞,进行连续传代,发现病毒收获液的血凝效价随着传代次数的增加而逐渐降低,当连续接种传代四次之后,细胞裂解液中已经检测不到流感病毒了。上述的实验证明了指定的疫苗生产用流感毒株在细胞上适应性差,不能有效繁殖,所以如果要利用细胞作为基质来生产流感疫苗,还需要从其他方面进行探索和改进。第二部分微载体培养细胞及培养型流感病毒细胞适应株的探索微载体细胞培养技术是一种微载体与生物反应器结合的技术,现己广泛应用于生物工程领域,成为大量获取细胞的一条途径。不仅如此,利用微载体培养细胞可避免普通方法培养细胞时存在的细胞去分化现象,有利于细胞表型的维持,提高细胞的质量。本实验研究了细胞在微载体上的生长状况继而以微载体上生长的细胞为基质培养了型流感病毒,初步确定了该毒株的培养
中国医学科学院中国协和医科大学硕士学位论文条件。关键词:流感病毒;细胞;微载体
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对流感病毒的感染有一定疗效,但并不能消除流感病毒给人类造成的威胁㈣,第一部分不同类别的流感病毒毒株在细胞上的传代前言流感病毒归属于正粘病毒科,是有包膜的,含单股负链鸡胚生产流感疫苗,则存在着很大的安全隐剧虼耍琖建议用哺乳动物细胞有赴赴ⅰ甅赴榘渲兄挥蠽中国医学科学院中国协和医科大学硕士学位论文牟《荆H吮涣鞲胁《靖腥竞螅沙鱿指呷取⑼吠础⑼吩巍⒒肷硭嵬础乏力、干咳、流鼻涕等中毒症状,少数病例还伴有食欲减退、呕吐、腹泻等消化道症状【浚飞狭鞲胁《驹死啻垂薮蟮脑帜眩曛年的流感大流行殖浦!拔靼嘌懒鞲小在全世界夺走了至少两千万人的生命。至今为止,流感病毒依然是人类尚不能有效控制的传染病之一【浚晌@人类的一大难题,在美国每年大约有怂烙诹鞲校嗟娜怂烙诹鞲邢喙疾病【淙挥猩偈共《疽┪如神经氨酸酶抑制剂或某些离子通道阻断剂因此目前接种流感疫苗是预防流感和控制流感大流行的最经济而且行之有效的方法4车闹票噶鞲幸呙绲姆椒ㄐ枰S玫郊ε撸」懿扇×擞行У拇炕艺,但是仍然存在着许多不足,不仅成本昂贵,而且鸡胚的残留物可能引起过敏反应【摊浚匾5奈侍馐羌ε呃丛吹牟《驹诰ε吡ù蟪3R鸨异,结果使鸡胚制备的流感疫苗不能与人群中的流感毒株完全匹配,另外在禽流感高发期,可能会因为鸡的大量感染死亡而缺乏制备疫苗的原料,此时如仍使用细胞培养流感病毒来替代鸡胚生产流感疫苗【】,这样其抗原性更接近自然流行株,还可减少宿主蛋白成分,《驹鲋郴实拇ù细胞是娑ǖ目捎糜谝呙缟拇ù赴担虼耍芯縒指定的流感病毒疫苗生产用毒株在细胞上的增殖情况,为使用细胞制备流感疫苗的可行性提供了参考依据。本实验中,三个型别的流感病毒疫苗株被分别接种到鶹赴喜在适合于流感病毒繁殖的最优化条件下连续传代,发现病毒收获液的血凝效价随着传代次数的增加而逐渐降低,当连续接种传代四次之后,通过血凝试验和
一、实验材料和方法皿一胰酶由旧中国医学科学院中国协和医科大学硕士学位论文燃觳馐侄卧谙赴呀庖褐芯鸭觳獠坏搅鞲胁《尽R陨系氖笛榻峁明了付ǖ囊呙缟昧鞲卸局暝赩赴鲜视π圆睿荒苡行Х敝常所以如果要利用细胞作为基质来生