测定黄芩中黄芩苷的定性和定量方法.doc

、塑料或铝基片上,成一均匀薄层,待点样、展开后,与适宜的对照物按同法在同板上所得的色谱图对比,用于中药制剂的鉴别。该法是黄芩苷常用的定性分析方法,一般采用吸附薄层鉴定,常用硅胶和聚酞***作为吸附剂。,还可分离精制纯化样品,一定程度上避免共存成分的干扰,使定性鉴别过程中显色反应更加清楚明了。常用甲醇、乙醇进行提取或萃取。***。在硅胶薄层色谱中,硅胶除对黄芩苷产生物理吸附外,还与黄芩苷的游离酚轻基产生氢键吸附,故易出现拖尾现象,采用氢氧化钠或醋酸钠制备的硅胶G板可有效改善拖尾现象。聚酞***薄层色谱法利用聚酞***与黄答普的酚轻基产生氢键吸附的原理进行分离。,根据黄芩苷的极性,展开剂常含酸或水。聚酞***对黄芩苷的吸附能力较大,需用具有较强极性的展开剂,常用醋酸。,可与金属离子如铝离子、铁离子等发生络合反应而显色,故可用三***化铝、三***化铁或通用显色剂硫酸进行显色。显色反应可采用在紫外光下观察斑点和喷显色剂相配合的方法。,具有高效的分离,灵敏的检测和快速的分析的特点,既能用于微量组分的分析测定,又能用于大量的制备分离,是中药成分研究中一种非常重要的分析手段,现在HPLC已成为测定黄芩及其制剂中黄芩苷的主要方法。,含黄芩的复方制剂化学成分更加复杂,进行样品处理可以将黄答首从样品中释放出来,并制成便于分析测定的稳定试样,还可除去杂质、纯化样品,提高含量测定的重现性和准确度,也起到了保护色谱柱的作用。通常用甲醇或乙醇作提取或萃取液,经过一系列分离、纯化,。如在小儿清肺口服液的质量标准研究,,加甲醇稀释至50ml,混匀,过滤,续滤液作为供试品溶液。用HPLC法测定小儿感冒片中黄芩苷的含量。样品用70%乙醇超声提取,滤过,滤液置50ml容量瓶中,加70%乙醇至刻度作为供试品。2,2固定相黄芩苷具有羟基,在硅胶柱上直接进行高效液相色谱分离效果不太好,而用RP一HPLC法分离效果较好。现常用固定相是烷基键合相如C8,Cl8键合相,其中又以Cl8最常用。,加入一定量的能与水互溶的极性调整剂,常用甲醇、乙***,因黄芩苷呈弱酸性,为抑制解离在流动相加入少量的酸如磷酸、醋酸等,能改善峰形更加尖锐利于分析。亦有将离子对试剂加入含水的流动相中,用反相离子对色谱法来分析。,常用紫外检测器,又以光电二极阵列检测器最常用。因黄芩苷在280nm处有最大吸收,通常在280nm左右进行检测。(通过三号筛),精密称定,置锥形瓶中,加乙醇85ml,,放冷,连同沉淀一并移至100ml量瓶中,加乙醇至刻度,摇匀。用干燥滤纸滤过,弃去初滤液,精密量取续滤液5ml,置50ml量瓶中,加乙醇至