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实验二影响酶促反应的因素
一、试验目
1．经过试验, 观察温度、pH值、激活剂与抑制剂对酶促反应速度 影响。
2．能利用所学 生化知识对试验结果进行正确 分析。
二、试验原理
利用淀粉及其水解产物 颜色反应, 来比较唾液淀粉酶在不一样条件下催化淀粉水解 程度, 从而判定温度、pH、激动剂和抑制剂对酶 活性影响。
淀粉
糊精
麦芽糖和葡萄糖
蓝色
碘
紫色→红色→无色
无色
碘
碘
＋
＋
＋
↓
↓
↓
二、试验原理
在低温时, 酶活性降低, 酶促反应速度较慢, 甚至停止; 伴随温度升高, 酶 活性恢复, 反应速度加紧; 当达成最适温度时, 酶 活性最大, 酶促反应速度达成最大。人体内大多数 酶 最适温度在37℃左右。温度过高, 酶变性失活, 酶促反应速度下降, 甚至停止。
每种酶都有最适 pH值, 在最适pH值时, 酶 活性最大, 酶促反应速度最快; 偏离酶 最适pH均可引发酶蛋白变性而降低或失去活性。唾液淀粉酶 。
***离子对唾液淀粉酶有激活作用; 铜离子对唾液淀粉酶有抑制作用。
三、试验材料
%淀粉溶液 取可溶性淀粉1g, 加5ml蒸馏水, 调成糊状, 再加80ml蒸馏水, 加热并不停搅拌, 使其充足溶解, 放冷, 最终用蒸馏水稀释至100ml。
, , 混合即成.
, , 混合即成.
, .
%NaCl溶液
% CuSO4溶液







【注意事项】
洁净, 避免杂质影响反应结果
, 确保一致。
四、试验方法
稀释唾液制备 用水漱口, 含蒸馏水咀嚼2分钟后, 把唾液吐进烧杯中备用。（注: 唾液淀粉酶活性含有个体差异, 按下述各试验方法进行试验, 有部分同学可能失败, 可重新操作, 但在重做过程中, 要依据第一次试验结果改变稀释唾液 用量, 反应太慢, 则增加稀释唾液用量, 假如反应太快, 则降低稀释唾液 用量）
煮沸唾液 制备 取上述唾液约5ml, 放入沸水中煮沸5分钟, 取出备用。
（一）温度对酶促反应速度 影响
管 号
1
2
3
缓冲液（）
20滴
20滴
20滴
1%淀粉溶液
10滴
10滴
10滴
把三支管溶液摇匀，然后分别放至相应的温度中水浴预温
预温温度
0℃
37℃
37℃
预温5分钟后取出，继续向各管加入相应唾液
稀释唾液
10滴
10滴
—
煮沸唾液
—
—
10滴
把三支管摇匀，然后分别放至相应的温度中水浴10分钟，加碘2滴
水浴温度
0℃
37℃
37℃
结果与分析
取白瓷板一块, 向各凹分别加1滴碘液, 每隔半分钟用滴管或玻棒从2号管取溶液1滴, 加到已加有碘液 小凹中, 观察颜色改变, 直至与碘不呈色时（即只显棕黄色时）, 向各管加碘液1滴, 摇匀观察颜色改变(切记勿摇动)。摇匀再观察。