生物化学ppt第十章核酸的酶促降解和核苷酸代谢.ppt

第十一章核酸的酶促降解和核苷酸代谢第一节核酸的酶促降解第二节核苷酸的分解代谢第三节核苷酸的生物合成第一节核酸的酶促降解核酸酶核苷酸酶核苷酸磷酸化酶核酸核苷酸核苷碱基+戊糖磷酸一、核一、核酸酸酶酶 1 1、核酸酶的分类、核酸酶的分类( (1 1) )根据对底物的根据对底物的专一性分为专一性分为( (2 2)根据切割位点分为)根据切割位点分为核糖核酸酶核糖核酸酶( (RNase RNase ) )脱氧核糖核酸酶脱氧核糖核酸酶( (DNase DNase ) )非特异性核酸酶非特异性核酸酶核酸内切酶核酸内切酶核酸外切酶核酸外切酶 2 2、、核酸酶的作用特点核酸酶的作用特点核酸酶:生物体内存在的水解核酸磷酸二酯键的酶类,统称核酸酶外切核酸酶对核酸的水解位点 5′ pppp OH B ppp p3′ BBBBBBB 牛脾磷酸二酯酶(5′端外切 5得3)蛇毒磷酸二酯酶(3′端外切 3得5) 其专一作用于 RNA ,对 DNA 及其它磷酸二酯化合物不作用或作用活性很低。 Pu :嘌呤 Py :嘧啶内切核酸酶水解位点内切核酸酶对 RNA 的水解位点示意图 5′pppp OH Py Pu Py Py 1′pppGACU pppGA 3′ RNAase I RNAase I RNAase T 1 专一水解鸟甘酸二酯键 RNAase T 1 Pu :嘌呤 Py :嘧啶 DNA ,能识别 DNA 双链上的特定位点, 称为限制性内切酶,也称限制酶。***化酶:细菌除具有限制酶外,还具有一种对自身 DNA 起修饰作用的***化酶。限制酶和其相应的修饰酶对底物 DNA 的识别和作用的部位是相同的。常用的 DNA 限制性内切酶的专一性酶辨认的序列和切口说明‥‥ A G C T ‥‥‥‥ T C G A ‥‥‥‥ G G A T C C ‥‥‥‥ C C T A G G ‥‥‥‥ A G A T C T ‥‥‥‥ T C T A G A ‥‥‥‥ G A A T T C ‥‥‥‥ C T T A A G ‥‥‥‥ A A G C T T ‥‥‥‥ T T C G A A ‥‥‥‥ G T C G A C ‥‥‥‥ C A G C T G ‥‥‥‥ C C C G G G ‥‥‥‥ G G G C C C ‥‥ Bam H I Alu I Bgl I Eco R I Hind Ⅲ Sal I Sma I 四核苷酸,平端切口六核苷酸,平端切口六核苷酸,粘端切口六核苷酸,粘端切口六核苷酸,粘端切口六核苷酸,粘端切口六核苷酸,粘端切口限制性内切酶的命名和意义限制性内切酶的命名和意义 Eco R I Eco R I 序号序号属名属名种名种名株名株名例: 例: Eco R I Eco R I , ,这是从大肠杆菌( 这是从大肠杆菌( Ecoli Ecoli ) )R R菌珠中分离出的一种限菌珠中分离出的一种限制性内切酶制性内切酶限制性内切酶是分析染色体结构、制作限制性内切酶是分析染色体结构、制作 DNA DNA 限限制图谱、进行制图谱、进行 DNA DNA 序列测定和基因分离、基因体外序列测定和基因分离、基因体外重组等研究中不可缺少的工具,是一把天赐的神刀, 重组等研究中不可缺少的工具,是一把天赐的神刀, 用来解剖纤细的用来解剖纤细的 DNA DNA 分子。分子。