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临检〔二〕知识点整理
第一节 细胞病理学基本检验技术
1、标本采集方法：①直接采集法②自然分泌液采集法③灌洗法④摩擦法⑤细针穿刺抽吸法
2、涂片制备方法：①推片法②吸管推片法③涂抹法④压拉涂片法⑤喷射法⑥印片法⑦微孔滤膜过滤法
3、标本固定
〔1〕目的：①固定：保持细胞的自然形态，以防细胞的自溶及细菌导致的***②保持细胞内的化学物质
〔2〕常用固定液：①Carnoy固定液：处理明显血性的标本，特点是渗透性强，固定效果好②乙醇***固定液③95%乙醇固定液
〔3〕方法：①▲带湿固定〔wet fixation〕：涂片后标本尚未干燥即行固定的方法称为带湿固定。将标本涂片迅速浸入固定液中，在固定过程中细胞不与空气接触，使细胞质脱水、蛋白质凝固。此固定法适用于巴氏染色或HE染色，该法固定后染色的细胞结构清晰，染色鲜艳。②干燥固定：此固定方法适用于瑞—姬染色。湿固定法细胞变小，干燥固定细胞变大。
4、标本浓缩技术：①离心法②细胞离心法③滤膜过滤法④细胞块法⑤液基细胞学技术
5、染色方法：
〔1〕巴氏染色法：鳞状上皮过度角化细胞胞质呈橘黄色；角化细胞显粉红色；而角化前细胞显浅绿色或浅蓝色，适用于上皮细胞染色或观察***涂片中激素水平对上皮细胞的影响。
〔2〕苏木精—伊红〔hemotoxylin eosin,HE〕染色法：适用于痰液涂片、穿刺细胞标本。胞核呈紫蓝色，胞质淡玫瑰红色，红细胞呈淡朱红色。
〔3〕瑞特—吉姆萨染色法〔wrightgiemsa atain〕；本方法多用于血液，骨髓细胞学检查。
六、细胞病理学诊断
●1、〔多项选择〕涂片通常由各种复杂细胞成分组成，因病变组织或采样部位不同，涂片上可同时见到正常和异常细胞。通常，涂片上正常同类同层细胞形态是均一的，细胞核反映的是细胞增殖状态和能力，细胞质反映的是细胞起源、功能状态和分化程度。
细胞活性增加可以是生理性的，如激素调节引起的细胞增生〔子宫内膜的周期性增生、生长激素促使骨骼的生长〕，也可以是损伤性的，如修复〔repair〕和再生〔regeneration〕，或肿瘤性异常。细胞活性减低多为激素〔如低甲〕、衰老〔如卵巢功能降低〕或凋亡等生理性情况，细胞可发生萎缩和退化变性。
〔一〕细胞数量
1、细胞过多〔hypercellularity〕表示增殖过程指数增加，代表增生或肿瘤。
2、细胞过少〔paucicellularity〕也并非表示无恶性细胞的存在，与标本的采集、肿瘤进展、肿瘤类型有关。分化差的恶性肿瘤时，细胞常散在脱落，形态类似于正常。因此，足够量的标本是提高结果解释可靠性的重要因素。
★〔二〕细胞结构特征
在细胞学涂片中常常缺乏细胞结构特征，而采集大量细胞时能显示组织学特征。
1、涂片上，正常上皮细胞常保持细胞极性〔cell polarity〕和细胞间黏附性〔intercellular adhesion〕。
所谓极性，就是一种不对称性，一种非均衡性，这种不对称性是细胞生长的基础，正是因为细胞的不对称性生长，产生了极性，这才完成细胞的各项功能活动。
极性：细胞不同表面在结构和功能上具有明显差别，它们朝向身体表面或有腔器官的腔面称为“游离面〞，与游离面相对的朝向深部组织的一面称为“基底面〞，而上皮细胞之间的连接面称“侧面〞。
细胞间黏附性，是细胞间信息交流的一种形式，可溶性递质称细胞黏附分子，是一种跨膜糖蛋白。相邻细胞以钙黏蛋白相互结合，钙黏蛋白也是一种细胞粘附分子，镶嵌于细胞膜。
2、腺上皮细胞多呈规那么排列，单层成片，正面观呈“蜂窝状〞，侧面观呈“尖板条栅栏状〞。
3、增生和良性肿瘤的上皮细胞常保持良好的黏附性，呈特殊的外观，如乳头状、玫瑰花样结构。
4、合胞体样细胞边界改变和极性紊乱时应考虑肿瘤的可能。
5、典型的恶性上皮细胞的极性差，细胞间相互重叠，有时三维状聚集呈球形。
6、、癌细胞具有异常黏附性和异常聚集性2个主要特征。但是，正常淋巴细胞、分化差癌细胞的细胞间黏附性差，常呈散在分布，而淋巴瘤细胞〔肿瘤性淋巴细胞〕那么相反，两者很难鉴别。
7、良性基质细胞常呈卵圆形、梭形，细胞间疏松黏附或呈裸核，恶性基质细胞〔肉瘤〕与良性基质细胞类似，但细胞核和细胞质多异常。
〔三〕细胞核特征：是判断良性细胞与恶性细胞的关键。〔判断：多核细胞并不一定是恶性〕
细胞核形态的异常称为核异质〔dyskaryosis〕，分为轻度、中度和重度，或者低度和高度。
1、良性细胞核的一般特点：细胞核体积相对较小，核呈圆形、卵圆形或肾形，核边界光滑，染色质呈细颗粒状，分布均匀；涂片上同一类型细胞之间差别很小，称为单形性。
2、恶性细胞核的一般特点：
①核DNA含量增加会产生核染色致密，即染色过深〔hyperchromasi