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目的
掌握尿蛋白定性试验的方法。
方法一 磺基水杨酸法
原理
在酸性条件下,磺基水杨酸的磺酸根阴离子与蛋白质氨基酸阳离子结合,形成不溶性蛋白盐沉淀。
器材
小试管或凹玻片。
试剂
200g / L 磺基水杨酸溶液:磺基水杨酸
200g 溶于 1000ml
蒸馏水中。
标本来源
病人不同程度的蛋白尿标本。
尿蛋白定性结果判断
反应外观
结果报告
相当蛋白质含量( g/L )
仍清澈透明
(-)
<
微混浊
( ±)
~
明显白色混浊,但无颗粒
( + )
~
明显白色混浊且出现颗粒
( ++)
~
明显白色混浊且有絮状沉淀
(+++ )
~
严重混浊且有大凝块沉淀
(++++ )
>
操作步骤
以试管法为例:
1、加尿液在 2 支试管中各加清晰尿液 1ml( 如为混浊尿标本,应离心后取上清液;碱性尿应加冰乙酸数滴,
为 5 左右再试验 )。
2、加试剂在 1 支试管中加磺基水杨酸 2 滴并混匀, 1min 时与另 1 支试管中空白尿液比较,判断结果。
1
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3、判断结果见表。
报告方式
尿蛋白定性:阴性或阳性 (磺基水杨酸法 )
本法结果阳性,即可报告阳性。必要时可用加热乙酸法证实,并以加热乙酸法为准报告结果。
方法二 加热乙酸法
原理
加热煮沸使蛋白质变性凝固,加乙酸使尿 pH 接近蛋白质等电点 (pH5 左右 )而加速蛋白质沉淀。器材
中试管、木夹、酒精灯。
试剂
5% (V/ V)冰乙酸溶液。
标本来源
病人不同程度的蛋白尿标本。
操作步骤
1、加尿液在试管中加清晰尿液至管高 2/3 处,混浊尿标本应离心后取上清液再试验。
2、煮沸尿液用木夹夹持 (或手持 )试管下 1 /3 处,加热煮沸试管上 1/ 3 处内的尿液 (注意:应不断转动试管
防止尿液沸溅 )。
3、观察结果将试管上部加热处尿液与试管下部未加热尿液比较;观察有无混浊变化。
4、加试剂 在试管中加入 5% (v/ v) 冰乙酸 2 滴。
5、再煮沸尿液、立即观察结果,方法同步骤 3。
6、结果判断和报告见表。
报告方式
尿蛋白定性:阴性或阳性 (加热乙酸法 )
方法三 干化学试带法
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方法学评价
尿
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