AuNPs-PEG-AS1411纳米粒子对肿瘤细胞辐射敏感性影响硕士论文.doc

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硕士学位论文
论文题目
AuNPs-PEG-AS1411纳米粒子对肿瘤细胞辐
射敏感性影响
研究生姓名
马洪鸽
指导教师姓名
张保国
专业名称
放射医学
研究方向
肿瘤放射治疗
论文提交日期
2015年4月
中文摘要
目的：
本研究课题分别用MPA-PEG 、PEG-AS1411、PEG-cApt来修饰纳米金粒子，制备得******@MPA-PEG、AuNPs-PEG-AS1411、AuNPs-PEG-cApt纳米粒子。通过检测不同浓度******@MPA-PEG、AuNPs-PEG-AS1411、AuNPs-PEG-cApt纳米粒子联合X射线照射后对人宫颈癌HeLa细胞存活率影响和******@MPA-PEG、G在Hela细胞及细胞核的分布" AuNPs-PEG-AS1411、AuNPs-PEG-cApt纳米粒子在人宫颈癌HeLa细胞及细胞核的分布，及观察经******@MPA-PEG、AuNPs-PEG-AS1411、AuNPs-PEG-cApt纳米粒子预处理联合X射线对HeLa细胞DNA损伤的影响，探讨******@MPA-PEG、AuNPs-PEG-AS1411、AuNPs-PEG-cApt纳米粒子对人宫颈癌HeLa细胞辐射敏感性影响。
方法：
采用柠檬酸盐还原法还原***金酸制备纳米金粒子，并分别用MPA-PEG 、PEG-AS1411、PEG-cApt来修饰纳米金粒子，制备得******@MPA-PEG、AuNPs-PEG-AS1411、AuNPs-PEG-cApt纳米粒子；用纳米粒度及zeta电位分析仪检测其粒径；紫外可见近红外分光光度计检测其吸收光谱；电感耦合等离子体高分辨质谱仪检测其浓度。采用CCK-8法检测细胞活性，研究******@MPA-PEG、AuNPs-PEG-AS1411、AuNPs-PEG-cApt纳米粒子对人宫颈癌HeLa细胞的急性毒性作用；克隆形成法检测******@MPA-PEG、AuNPs-PEG-AS1411、AuNPs-PEG-cApt纳米粒子对HeLa细胞的长期毒性作用。采用克隆形成法检测不同浓度******@MPA-PEG、AuNPs-PEG-AS1411、AuNPs-PEG-cApt纳米粒子联合X射线照射后对人宫颈癌HeLa细胞存活率影响；采用电感耦合等离子体高分辨质谱仪检测每个HeLa细胞及细胞核对******@MPA-PEG、AuNPs-PEG-AS1411、AuNPs-PEG-cApt纳米粒子的吸收量。采用γ-H2AX荧光斑点法检测DNA双链断裂数量，研究******@MPA-PEG、AuNPs-PEG-AS1411、AuNPs-PEG-cApt纳米粒子对X射线导致的HeLa细胞DNA双链断裂影响。
结果：
⑴ 采用柠檬酸盐还原法还原***金酸制备尺寸均匀的纳米金粒子（AuNPs），粒径大小为44nm；分别用MPA-PEG 、PEG-AS1411、PEG-cApt对其修饰后制得******@MPA-PEG、AuNPs-PEG-AS1411、AuNPs-PEG-cApt纳米粒子，其粒径大小分别为48nm、50nm、50nm。
⑵ CCK-8实验结果显示：不同浓度******@MPA-PEG、AuNPs-PEG-AS1411、AuNPs-PEG-cApt纳米粒子分别处理人宫颈癌HeLa细胞24h、48h、72h后，HeLa细胞存活率均大于95%，表明******@MPA-PEG、AuNPs-PEG-AS1411、AuNPs-PEG-cApt纳米粒子的急性细胞毒性很小。采用细胞克隆形成法检测不同浓度的******@MPA-PEG、AuNPs-PEG-AS1411、AuNPs-PEG-cApt三种纳米金粒子对HeLa细胞的长期的毒性作用。结果表明：随着药物浓度的增加，在不同浓度的******@MPA-PEG、AuNPs-PEG-AS1411、AuNPs-PEG-cApt的作用下，HeLa细胞的存活率明显降低。当******@MPA-PEG、AuNPs-PEG-AS1411、AuNPs-PEG-cApt浓度达到10mg/L时，%、%、%，表明******@MPA-PEG、AuNPs-PEG-AS1411、AuNPs-PEG-cApt对HeLa细胞具有长期毒性作用，浓度越高，毒性越大。
⑶ 每个HeLa细胞及细胞核对******@MPA-PEG、AuNPs-PEG-AS1411、AuNPs-PEG-cApt 的吸收结果显示：当药