免疫测定方法学和临床应用.ppt

免疫测定方法学临床应用免疫测定方法学临床应用●免疫分析技术简介乙肝病毒标志物定性、定量检测常见问题抗HCV检测问题●ANAENA检测问题●TPAb检测问题TB-Ab检测问题免疫分析技术●早期的免疫分析技术免疫扩散、免疫电泳、直接及间接血凝、被动血凝、补体结合实验●特点这些检测方法成本低、结果易于判断、技术上便于掌握,但不便于免疫检测自动化后来的免疫分析技术放射性核素标记、荧光免疫标记、酶免疫标记稀土元素标记及化学发光分子标记●特点:快速、灵敏、特异、易于测定等实验室的免疫检测自动化奠定了基础待测物质浓度与检测手段121⊥1111免疫分析TherapeuticDrugsThyroidHormoneFertilityHormoneAllergyCancerMarkersInfectiousDiseaseSerumProteins免疫分析技术4放射免疫的创立●1959美国Yalow&Berson●1960英国Ekim's●1977获诺贝尔医学生物学奖医学生物学超微量分析的里程碑免疫分析技术放射免疫的精髓RIA●R:放射性核素示踪高灵敏不直接探测待测物,而探测待测物上的标记信号(标记物的放大效应)I:免疫学反应高特异废除以往沿用的无机或有机试剂,代之以抗体为结合剂免疫分析技术放射免疫面临的挑战其主要的缺陷是:●半衰期短,限制了药盒使用寿命由于标记物的不断变化,带来药盒批间、批内较大的差异,标准曲线无法保存备用●反应时间过长(数小时至过夜)●结果测量依靠时间累计,至少每一样品一分钟以上原因都造成放射免疫无法进行自动化分析理论和实践证明其分析的限度是107分子/mL或1012mL,要再提高有困难免疫分析技术7新技术的挑战放免其必然受到一代新的更灵敏、稳定、快速,而且全自动化的测量技术的挑战。从90年代开始放免分析在国际上每年以10-15%的速度下降,这是事实。一些大型的实验室,标木量大的项目都已逐步应用各种非放免标记的自动化设备来进行分析,这是技术发展的必然规律免疫分析技术标记免疫方法名称仪器放射性核素放射免疫RIAY-计数器免疫放射度量分析IRMAy-计数器免疫发色ELISAES-300、SR-1、ESS、MerlinImmulite、MAGIA荧光荧光偏振免疫FPIATDX、AXSYM时间分辨荧光DELfiaWallacarcus1235发光发光免疫ACS-ISOSE电化学发光免疫ECLElec免疫分析技术自动标记免疫分析的优点一、消除手工操作的误差灵敏度高、稳定性好速度快四、当天/隔天报告实现短时间反馈提高临床诊断效率和质量,有效降低总医疗费用免疫分析技术10