植物生物技术第十一章转基因植物的分子检测及安全评价Goodafternoon第一节转基因植物的检测第二节转基因植物的安全性评价本章主要内容第11章转基因植物的分子检测及安全性评价本章教学目的与要求转基因植物检测方法人们对转基因安全性的几类问题第11章转基因植物的分子检测及安全性评价第一节、转基因植物的检测外源基因是否进入受体植物细胞进入植物细胞的外源基因是否整合到植物染色体上整合到染色体上的外源基因是否表达能否产生理想的目的表型一、外源基因整合状态检测(一)、PCR检测方法检测报告基因或目的基因快捷、简易、,可以直接利用细胞裂解液,或用快速微量法(CTAB或SDS法)制备基因组DNA要有阴性对照和阳性对照*:DNA模板,dNTP,TaqDNA聚合酶,buffer反应程序:变性(94~95oC)复性延伸(37~55oC)(70~72oC)72oC延伸10min30-35cyclesDNA扩增100万倍转基因棉花再生植株的NPT-Ⅱ报告基因的PCR检测M:1Kb的分子量标准;P:质粒;C:非转基因对照;1-27::检测迅速灵敏度高,可以检测到纳克级外源DNA操作方便,对DNA质量要求不高不足之处在于假阳性偏高、不能提供整合位点的遗传信息
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