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流式细胞仪操作.pptx


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流式细胞技术基础BDFACSAria1BeckmanMoFloAstriosBDCalibur我们拥有的流式细胞仪BeckmanGallios一、光源二、流动室三、,355nm、405nm、457nm、488nm514nm、561nm、633nm(Dream)355nmSidePopulation(SP)必须滴405nm免疫多色分析PACIFICBLUEBrilliantviolet(405)457nm染色体分选488nmGFPAlex488PEPE-CY5PE-CY7TEX-REDPercp5-5….514nmYFP561nmMcherryPE最佳的激发波长633nmAPCAPC-CY7Alexa6472.***灯现在用的比较少了,比较大的缺点是能量比较低光源流式细胞仪的光信号散射光信号荧光信号----前向角散射光(FSC,ForwardScatter)入射激光的同向散射光信号,反映了细胞相对大小及其表面积----侧向角散射光(SSC,SideScatter)入射激光90角的散射光信号,反映了细胞粒度及细胞内相对复杂性荧光素吸收激光能量后将吸收能量释放,转换为振动能和热能释放较入射光波长更长的光量子前向角散射光—FSCForwardanglelightscatterFALSFALSSensorLaser侧向角散射光—SSCFALSSensor90LSSensorLaserFSC-SSCApplicationWhatcanwereadfromthisfsc-sscdotplot?,—SSC图能够帮助大家判断细胞的相对大小,,反应被测细胞的细胞膜、细胞质、核膜的折射率和细胞内颗粒的性状荧光是怎么产生的呢?510nm-530nm阴性细胞为何有峰图?anicdyes:AlexaFluors,Cydyes,Horizon,Dylight,etcProteins:PE,APC,GFP,mCherrySemiconductornanocrystals:Qdots,Crystalplex,anicpolymers:BrilliantVioletTMHigh-SensitivityFluorescence™Alexa488fluorescentchemistryfamilies

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  • 时间2020-09-18