菌液的制备及保存讲课教案.doc

,但又不至于死亡,从而达到保藏的目的。规范菌种原始菌液的制备及长期保存。。原始菌液--由原始菌液直接稀释,或根据一般试验需要而等量稀释的特定浓度的--工作菌液孢子或细菌的悬浮液。,并进行传代(芽孢杆菌除外)。每一新菌种在适宜的琼脂平板上划线分离,检查是否纯种,观察菌落形态并用革兰氏染色或芽孢染色法进行镜检,如果是芽孢悬浮液,用常规方法测定其存活孢子数。经检查如果满意,贴上合适的标签,并将贮备菌存放在实验室专用的冰箱里~8℃)或冷冻室内,以避免与实验室正在使用的其它菌种相混淆,作好菌种传代的记(2录以便能追踪传代史。生孢梭菌的孢子悬浮菌应每年制备一次。原始菌种的传代次数最多传至第五代。。,使其在室温下慢慢融化;;,将接种后的培养基在适当温度下培养时间;液体培养基后所得的菌作为第二代。(或更长时间)培养的菌液摇匀,,把经过只培养基平板上,轻轻转动平板,使菌液均匀分布于平板表面。不同培51ml,无菌转移至养基适用于不同菌种。另用一只平板,划线分离菌液,培养之,以检查菌液是否纯种。,不同菌种所需培养周期不一。,;生长菌-,这样可确保提到浓50%7天或更长时间才能得到孢子-需要3~。对需长时间培养或培养温度较高(55℃)的平板进行适当密封,以免培养基失水干裂。天才能获得明显的分生孢子生长物,将平145~,一般需要板封口,以免分生孢子污染空气。)加至经培养后***化钠磷酸缓冲液(,。用弯曲的接种棒(或无菌玻璃弯头)轻轻地刮平板表面,。但注意不要划破培养基。倾斜平板,使菌悬液集中于平板一端,用无菌注射器或无只平板中的菌悬液收集于一只大小合适,便于封口的试管中。5菌吸管吸取菌悬液,:)(代数+有效期(孢子悬浮液的有效期为一年),即应补记在标签上。,以后,每次使用该原始菌液时,,都应事先重新标定其浓度。前一次标定浓度仅供参考;除非有定量要求,一般生长态菌的原始菌液无需标定,生长菌很易死亡,。。将菌种接种在适宜的固体斜面培养