重组α干扰素（β干扰素或GLP-1）发酵制备-年产100kg.doc

目录第一章工艺概述 (并以IFN-α为例) 8第二章生产规模及工艺流程 、离心 -透析 ,蛋白质含量,分子量 、残余DNA :紫外光谱,肽谱,N端序列 ,内***,残留抗生素检查 14第三章物料衡算 15第四章生产设备选型说明 22第五章工艺主要设备一览表 23第六章车间设计说明 26第七章车间定员 28第八章结束语 28附录:,具有抗病毒、抗肿瘤和免疫调节等多种生物学活性,按其抗原性不同可分为α、β、γ三个亚型,由于干扰素具有广谱抗病毒活性和抗肿瘤等多种生物学功能,且临床疗效显著,所以天然干扰素或基因工程干扰素广泛用于防治病毒性疾病和肿瘤。干扰素具有很高的生物活性,1mg即具有10亿个活性单位。其抗病毒作用无特异性,由一种诱导剂诱导细胞产生的干扰素可抑制多种病毒的复制,是广谱的抗病毒物质。现在一般将干扰素分为Ⅰ型和Ⅱ型两类。Ⅰ型干扰素又包括α干扰素和β干扰素等。本课题研究的是α干扰素的发酵制备工艺。α干扰素是单核细胞产生的相对分子质量18000的多肽,因其蛋白质分子的变异及肽链23位和34位氨基酸序列的组分不同,又可分为α-2a、α-2b、α-2c3种。干扰素的理化性质较稳定,60℃1h不被破坏,在pH2~11范围内不变性。由于IFN-α中没有糖基化位点,很适合在大肠杆菌中表达,表达产物与天然干扰素的生物活性接近,且具有产量高,工艺简单,成本低等优点。所以此次工艺是以大肠杆菌为出发菌种发酵制备的。Ⅰ型干扰素具有广谱的抗病毒活性,对多种病毒如DNA病毒和RNA病毒均有抑制作用;但这种效应不是直接的,而是通过对宿主细胞的作用引起的。①对干扰素敏感的细胞表面存在于干扰素受体,核内有“抗病毒蛋白”基因,受干扰素作用后该基因活化,产生的抗病毒蛋白可阻止病毒mRNA翻译,并促进病毒mRNA降解。②干扰素能提高细胞表面MHCⅠ类分子的表达水平,受到病毒感染的细胞表面MHCⅠ类分子的增加有助于向Tc细胞递呈抗原,引起靶细胞的溶解。③干扰素可增强NK细胞对病毒感染的杀伤能力。Ⅰ型干扰素能抑制细胞的DNA合成,减慢细胞的有丝分裂速度;这种抑制作用有明显的选择性,对肿瘤细胞的作用比对正常细胞的作用强500~1000倍。另外,Ⅱ型干扰素也可通过增强机体免疫机制、加强免疫监督功能来