临床分子生物学检验复习提纲.docx

临床分子生物学检验DVA的一级结构是由哪种化学键连接?两条单链间:碱基氢键;相邻碱基间:范德华力;脱氧核苷酸间:3’-5’磷酸二酯键可以出现在人体循环系统中的游离核苷酸是?脱氧核苷酸,核糖核酸原核生物DNA的复制方式是?θ型半保留复制核小体结构中的组蛋白是哪些蛋白?各自的作用有?H2A、H2B、H3、H4:核心颗粒,形成核小体。H1:连接线上,锁定核小体、参与包装PCR体系中抑制Taq酶活性的物质有哪些?过量加入什么会减少Mg2+浓度导致Taq酶活性降低?游离的Mg2+浓度;dNTP、引物和模板DNA等中的磷酸基团,螯合剂如EDTA均可与镁离子结合减少Mg2+浓度。PCR扩增时,链的延伸从什么地方开始?对于引物是哪一端?模板链呢?从引物的3’端开始,方向5’到3’;模板DNA序列的3’端;3’端在波长260nm的紫外线下,A值=1时双链DNA的浓度大约相当于?50ug/ml的双链DNA。(40ug/ml的单链DNA或单链RNA,33ug/ml的单链寡聚核苷酸)(紫外分光光度法,核酸浓度的鉴定)计算公式:双链DNA=50×A260样本×稀释倍数÷1000(ug/ul)单链DNA/RNA=40×A260样本×稀释倍数÷1000(ug/ul)单链寡聚核苷酸DNA=33×A260样本×稀释倍数/1000(ug/ul)关于基因的定义正确的是?能编码有功能的蛋白质多肽链或合成RNA所必需的全部核酸序列,是核酸分子的功能单位。是遗传的结构和功能单位。一个基因大都包括编码蛋白质多肽链或RNA的编码序列,保证转录和加工所必须的调控序列(启动子,增强子),5’端、3’端非编码序列。β—地中海贫血患者的基因缺陷主要是??有很高的耐热稳定性酶量增加使反应特异性下降,酶量过少影响反应产量;TaqDNA聚合酶无3′→5′外切酶活性,因而无校正功能,在复制新链的过程中会发生碱基错配;TaqDNA聚合酶在每次循环中产生的移码突变率为1/30000,碱基替换率为1/8000,因此扩增的片段越长,错配的机率越高。实时荧光定量PCR技术中非特异性荧光染色技术??限制性片段长度多态性(RFLP);短序列重复序列(STR);单核苷酸多态性(SNP)???原核生物细胞中只有1种RNA聚合酶,可参与合成mRNA、tRNA和rRNA。RNA聚合酶催化聚合反应时需要Mg2+或Mn2+。该酶无校正功能。PCR反应的特异性取决于?引物DNA的变性是指?在某些理化因素作用下,DNA双链解开成两条单链的过程。变性后其它理化性质变化:增色效应 粘度下降比旋度下降浮力密度升高酸碱滴定曲线改变 ?(1)DNA聚合酶(2)拓扑异构酶::兼具内切酶和连接酶活力,能迅速将DNA超螺旋或双螺旋紧张状态变成松驰状态,便于解链。(3)DNA解链酶(4)单链结合蛋白(SSB):结合在解开的DNA单链上,防止重新形成双螺旋。(5)引物酶和引发体:启动RNA引物链的合成。(6)DNA连接酶第一个分离到的抑癌基因是?视网膜母细胞瘤基因(Rb基因)