刚地弓形虫肌动蛋白基因克隆、表达及重组蛋白保护性免疫.doc

刚地弓形虫肌动蛋白基因的克隆、表达及重组蛋白的保护性免疫(可编辑)学校代码:分类号:学号:密级:刚地弓形虫肌动蛋白基因的克隆、表达及重组蛋白的保护性免疫研究生:郝海霞指导教师:殷国荣教授申请学位门类级别:医学硕士业专名称::生塑王程瘗苴所在学院:基础医学院年月日’.,学位论文独创性声明本人声明,所呈交的学位论文系在导师指导下本文独立完成的研究成果。文中任何引用他人的成果,均已做出明确标注或得到许可。论文内容未包含法律意义上已属于他人的任何形式的研究成果,也不包含本人已用于其他学位申请的论文或成果。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。本文如违反上述声明,愿意承担以下责任和后果:、交回学校授予的学位证书;、学校可在相关媒体上对作者本人的行为进行通报;、本文按照学校规定的方式,对因不当取得学位给学校造成的名誉损害,进行公开道歉。、本人负责因论文成果不实产生的法律纠纷。论文作者签名:日期:塑二年?舅旦日学位论文版权使用授权书本人完全了解山西医科大学有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅;本人授权山西医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表或使用学位论文或与该论文直接相关的学术论文或成果时,署名单位仍然为山西医科大学。保密论文在解密后应遵守此规定论文作者签名:期:二竺三年上旦日指导教师签名:期:趁垒年』月翌日本声明的版权归山西医科大学所有,未经许可,任何单位及任何个人不得擅自使用目录缩略词?.摘要;综述刚地弓形虫肌动蛋白研究进展肌动蛋白参与的滑行运动..肌动一肌球蛋白动力系统?.刚地弓形虫肌动蛋白的特征???实验一刚地弓形虫肌动蛋白基因的克隆、表达、鉴定及抗原性分析前言材料与方法实验方法?.:;参考文献???..材料与方法结果./、?.实验三??..重组弓形虫肌动蛋白滴鼻免疫小鼠诱导的免疫保护作用?一实验材料?实验方法?实验结果?讨仑.,、?..致谢??.个人简历?山西医科大学硕士学位论文缩略词??????????????????????????????????一中文全称英文全称缩略词。????????????????????????????????????????.,二氨基联苯******四乙酸钠短肌动蛋白?胎牛血清滑动相关蛋白?肠上皮内淋巴细胞一干扰素??免疫球蛋白免疫球蛋白白介素一。..???????????????????????????????????????????????????一分钟分子量肌球蛋白吸光度磷酸盐缓冲液聚丙烯酰***凝胶电泳聚合酶链式反应重组刚地弓形虫过氧化蛋白?’?.三羟***氨基甲烷缓冲盐水,,’,,,’,’四***乙二***刚地弓形虫肌动蛋白三羟***氨基甲烷一刚地弓形虫肌动蛋白基因的克隆、表达及重组蛋白的保护性免疫摘要实验目的对刚地弓形虫肌动蛋白基因进行克隆、表达、纯化,分析其抗原性,观察不同剂量免疫小鼠诱导的黏膜及系统免疫应答及最佳剂量免疫小鼠的抗弓形虫感染的能力,探讨作为弓形虫疫苗候选抗原的可能性。实验方法第一部分:构建重组质粒.,并在大肠杆菌中高效表达。收集、纯化酶切位点,扩增株弓形虫速殖子,提取总;设计合成引物并引入髓编码以的基因片段克隆到原核质粒中,经双酶切、及测序鉴定阳性克隆;在大肠杆菌/中用诱导表达,,通过稀释复性的方法获得大量表达蛋白,,用兔抗弓形虫血清做分析其抗原性。第二部分:观察不同剂量滴鼻免疫小鼠诱导的黏膜和系统免疫应答。/小只随机分为组,免疫组分别用嵋、肛、斗、/滴鼻免疫小中,对照组用等量鼠次,首免与二免间隔周,二免后周三免,溶于滴鼻。三免后第,眼静脉丛采血,分离血清。颈椎脱臼处死小鼠,采集小肠冲洗液、鼻咽和***冲洗液。法测定上述种冲洗液和血清。分离脾淋巴细胞计数并培养,。用和束激脾淋巴细胞,.试剂盒测定其增殖程度。确定的最佳免疫剂量。第三部分:观察滴鼻免疫小鼠诱导的抗弓形虫感染保护作用。/小鼠只随机分为组,用中滴鼻免疫小鼠次,首免与二免间溶于隔周,二免后周三免,,对照组用等量滴鼻。末次免疫后