分支杆菌噬菌体Chy2 分离及生物学特性.doc

,邬亭亭,彭丽,郭述良,罗永艾(400016重庆,重庆医科大学附属第一医院呼吸科)[摘要]目的分离鉴定新分支杆菌噬菌体并研究其生物学特性。方法以平板法从泥土中分离纯化噬菌体,紫外线诱导法鉴定溶原性,从噬菌斑大小,颗粒形态和限制性内切酶分析3方面比较Chy2、D29、TM4异同;以不同感染复数(MOI)扩增Chy2,测定最佳MOI;通过一步生长实验测出Chy2潜伏期、裂解期和裂解量;采用单斑法测定MOI的裂解2谱;检测MOI在不同pH值培养基中裂解耻垢分支杆菌mc155的能力。结果成功分离纯化1株分支杆菌噬菌体,命名为Chy2,其噬菌斑圆形透明,紫外线诱导法处理宿主菌后不能形成噬菌斑,头部呈椭圆形,长尾,基因组核酸能被双链-5DNA内切酶EcoR?、Hind?、BamHI及XbaI切开,大小约54kb,与D29、TM4差异大;×10;Chy22一步生长周期为270min,潜伏期210min,裂解期60min,裂解量为23;Chy2能裂解耻垢分支杆菌mc155、结核菌标准2株HRv、多数临床耐药株;,Chy2均能裂解耻垢分支杆菌mc155。结论Chy2属37长尾噬菌体科,基因组为双链DNA,宽噬谱广,是一种潜在的抗结核药物资源。[关键词]分支杆菌噬菌体;耻垢分支杆菌;结核分支杆菌;生物学特性;耐药结核病[中图分类号]R52IsolationandbiologicalcharacteristicsofMycobacteriophageChy2LiuPing,WuTingting,PengLi,GuoShuliang,LuoYongai(DepartmentofRespiratoryMedicine,theFirstAffiliatedHospitalofChongqingMedicalUniversity,Chongqing,400016,China)[Abstract]ObjectiveToisolateandidentifyanewmycobacteriophageandresearchonthebiologicalcharacteristicstoexploreitspotentialofanti--(UV),paredbytheplaquesize,-,-,,andtheirsizesareabout3mminthediameter,??longtail,,Hind,,TM4intheplaquesize,particlemorphologyandtherestrictionenzyme-××10PFU/mL,-stepg