survivin在非小细胞肺癌中表达的意义及其与caspase3、DFF45蛋白之间的相互关系.doc

survivin在非小细胞肺癌中表达的意义及其与caspase3、DFF45蛋白之间的相互关系.docsurvivin在非小细胞肺癌中表达的意义及其与caspase3、DFF45蛋白之间的相互关系【摘要】探讨survivin蛋白的表达在非小细胞肺癌(NSCLC)发生、发展方面的作用及其与临床病理特征之间的联系,与caspase3及DFF45表达的相互关系。方法运用免疫组织化学SP法对60例NSCLC、10例淋巴结转移癌、。结果NSCLC、淋巴结转移癌中survivin的阳性表达率分别为70%及90%,显著高于正常支气管粘膜上皮的阳性率10%。survivin在NSCLC中的表达与分化程度、TNM分期、淋巴结转移有关。而与年龄、性别、病理类型无明显相关。survivin表达与caspase3的表达呈负相关,而与DFF45的表达却呈正相关。结论survivin在NSCLC的发生、发展中起重要作用,可作为NSCLC的诊断指标,对NSCLC恶性程度的判断及预后也有一定参考价值osurvivin的作用是通过抑制caspase 3的表达,从而影响下游凋亡途径而发挥作用的。【关键词】非小细胞肺癌survivin细胞凋亡免疫组织化学0引言自从1997年Ambrosini等[1]首次发现survivin与肿瘤的关系后,其日益成为肿瘤研究热点。survivin属于凋亡抑制蛋白家族新成员,是具有抑制细胞凋亡和调节细胞分裂的双功能蛋白osurvivin选择性表达于包括肺癌在内的绝大多数恶性肿瘤,IAPs在凋亡途径的高度保守步骤是抑制效应酶caspase 3等的活化或催化底物的活性,而使凋亡发生抑制。Shin等[2]进一步研究认为survivin的二聚体与caspase二聚体以均称对等方式结合而抑制后者活性,caspase无法降解底物,从而使凋亡无法执行。本研究运用免疫组化SP法探讨survivin在肺癌中表达的意义及与临床病理特征的联系,在这方目前观点不一,对肺癌中survivin表达与caspase3、DFF45蛋白之间关系的研究目前也报道不多,本研究旨在为肺癌的诊断、治疗提供另一思路。1资料和方法标本来源80例标本随机取自湖北省肿瘤医院和东风总医院1999-XX年间病理存档的石蜡标本,所有手术患者术前均未接受过放、化疗,诊断均经常规病理切片证实,其中男43例,女37例,年龄35〜76岁,平均年龄63岁。其中正常支气管粘膜上皮10例,淋巴结转移癌10例,60例NSCLCo试剂兔抗人survivin多克隆抗体、鼠抗人caspase3单克隆抗体均为美国SantaCruz公司的产品,兔抗人DFF45多克隆抗体和超敏SP试剂盒均为即用型,均购自北京中杉生物技术公司。方法采用链霉菌抗生物素蛋白一过氧化酶连接(SP)染色法检测蛋白的表达,survivin抗体,caspase3抗体(微波修复,工作浓度为1:100)和DFF45抗体(高压修复)。用PBS代替一抗作阴性对照,以已知阳性片作阳性对照。三种蛋白均采用37£孵育lh,再放入4°C冰箱过夜,DAB显色,苏木素复染。结果判断survivin主要以胞浆中出现粗细不一的棕黄色为主,caspase3蛋白表达以胞浆内出现弥漫的棕黄色颗粒为主,DFF45蛋白表达主要是胞核呈棕黄色或棕褐色。在此基础上,参照文献[3,4]评分方法,首先将染色强度