上海海洋大学制药专业英语 木易oh.docx上海海洋大学制药专业英语木易OH(0834110)翻译P18115DNASEQUENCING【DNA测序】cine【DNA测序的两种方法】DNAcanbesequencedbythechemicalmethodorthechainterminationprocedure!DNA可以通过化学的方法和链终止法来测序】Thelatterisnowthemethodofchoiceinwhichthe(single-strandcd).【在测定单链DNA序列需要提供特泄的引物和人肠杆菌DNA聚合酶I的时候,品一种方法可以更好的合成互补链】Chainterminationmethod【链终止法】Fourincubationmixturesarcsetup,eachcontainingtheDNAtemplate,aspecificDNAprimer,(dNTPs).【四种孵化的混合物被建立:被一种混合物都包括DNA混合物,一个特定的DNA引物,大肠杆菌DNA聚介酶和四种dNDPs]Inaddition,eachmixUirecontainsadifferentdideoxynucleosidetriphosphateanalog,ddATP,ddCTP,ddGTPorddTTP.【另外,每一组混合物都包禽一种不同双脱氧核昔三磷酸:ddATP,ddCTP,ddGTPorddTTP.]Incorporationofadidcoxyanalogpreventsfurtherelongationandsoproducesachainterminationextensionproduct!模拟双脱氧团可以防止进•步的延伸从而产生了链终止产物】TheproductsareelectrophoresedonapolyacrylamidegelandtheDNAsequencereadfromthebandpatternproduced.【这个产品可以在聚丙烯酰***凝胶上电泳。然•会产生条带,在这条带张我们可以读出DNA序列】AutomatedDNAsequenciiigl自动DNA测序]AutomatedDNAsequencingusesthechainterminationmethodbutwithanoligonucleotideprimerlabeledwithafluorescentdye.【II动DNA测序是利用链终止方法同时还利用了用带有荧光染料的寡核廿酸的引物探针】Eachofthefourreactionsreceivesaprimerlabeledwithadifferentdye.【四种反应中的每一步都-个带有不同的染料的引物探针】Afterincubation,thereactionmixturesarepooledandelectrophoresedononelaneofapolyacrylamidegel.【在孵化Z麻,反应混介物就会聚集,然麻就会在聚丙烯酰***凝胶上面呈一条线式的电泳】The
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