分枝杆菌噬菌体的分离纯化及生物学特性研究.doc

分枝杆菌噬菌体的分离纯化及生物学特性研究.doc噬菌体Legendre的生物学特性及抗耐药结核潜力的初步研究刘平绑亭亭彭丽郭述良*罗永艾(重庆医科大学附属第一医院呼吸科,重庆400016)[摘要]目的研究噬菌体Legendre的生物学特性并初步探索其用于抗耐药结核的潜力。方法双层平板法制备Legendre的噬菌斑,观察其特点,纯化噬菌体,电镜观察Legendre形态;捉取Legendre基因组,限制性内切酶酶切分析确定英核酸类型;以不同感染复数扩Legendre,找出最和最小MOI;通过…drc潜伏期、裂解期和裂解量;纯化Legendre颗粒,免疫家兔,获得抗血清,通过屮和反应实验测定Legendre以及其它8种噬菌体和Legendre抗血清之间的吸附反应常数K值;采用单斑法测定Legendre的宿主谱:检测Legendre对紫外线、温度、***仿、酒精、酸碱度的耐受性。结果Legendre的噬菌斑圆形透明,边界清楚,Legendre头部呈多面体立体对称,直径平均为65nm,尾长平均为215nm:基因组核酸能被双链DNA内切酶EcoRI,HindIIIitBamHI切开,大小约65kb;Legendre最佳MOI为10"4,最小MOI为10HLegendre对耻垢分枝杆菌极度易感;Legendre感染宿主菌的潜伏期为180min,裂解期为120min,裂解量为13;LegendreK值为697,Legendre抗血清对菲对应噬菌体的中和活性有差异,对DNAIII、Bo4、Clark>Sedge、Leo高,对TM4、D291!1和活性较低;Legendre能裂解耻垢分枝杆菌、结核分枝杆菌标准株、多数临床耐药株;Legendre对紫外线、温度、***仿、酒楕、酸碱度均敬感。结论Legendre®于长尾噬菌体科,双链DNA噬菌体,抗原性低,宿主谱广,具有抗耐药结核潜力。[关键词]Legendre;耻垢分枝杆菌;结核分枝杆菌;生物学特性;耐药结核病|中图分类号]R52TheBiologicalCharacteristicsofMycobacteriophageLegendreandItsPotentialsinDrug-resistantTuberculosisControlLiuPing,WuTingting,PengLi,GuoShuliang*,LuoYongai(DepartmentofRespiratory^Medicine,theFirstHospitalofChongqingMedicalUniversity,Chongqing,400016,China)[Abstract]ObjectiveThispaperaimedtoresearchonthebiologicalcharacteristicsofmycobacteriophageLegendretoexploreitsanti-drug--