COFC诱导BEAS-2B细胞恶性转化及相关机制研究.pdf

南华大学
硕士学位论文
COFC诱导BEAS-2B细胞恶性转化及相关机制研究
姓名:张荣芳
申请学位级别:硕士
专业:卫生毒理学
指导教师:陈锋
20030501
英文缩写词索引次黄嘌呤鸟嘌岭磷姐妹染色单体交换程序合成虼襦堰克隆形成率烹调油烟冷凝物乙酸盐二***亚砜氢化乙锭酸核糖转移酶磷酸盐缓冲液活性氧·’二***荧光黄双噻唑兰相对荧光强度受壅圭丝刍塑蓥羞塑坐丕堂璧主堂垡逭塞
,从细胞、分子方面进行致癌机制的探讨,对其深入研究和预防、治疗提供依据。方法以永生化人支气管上皮细胞为研究对象,采用细胞培养技术研究细胞恶性转化过程:其中包括用光学显微镜直接观察细胞形态的改变;采用脱G逖≡裥耘嘌韵赴淖;醪郊觳猓河冒牍烫迮嘌韵胞转化进行证实;用流式细胞术检测细胞周期的改变。同时采用分光光度法和荧光光度法对细胞受到作用后细胞内外产生的活性氧和细胞膜上的附屑觳猓っ骰钚匝踉谙赴ぱ趸鹕酥衅鹨欢ㄗ饔谩结果饔糜贐赴罂梢鹣赴罅炕钚匝酰斐上赴な芩穑膜上负拷档停揖哂屑亮浚в叵怠;钚匝跏窍赴诩毙远拘灾产生损伤的主要原因。饔糜贐赴螅觳獾较赴贖蚍⑸槐洌⑶以有血清的培养基内血清抗性增加。说明细胞在受饔煤螅赴囊糯质发生了突变,并且对周围环境条件的选择性和依赖性减低。⒄6哉盏腂细胞为二倍体细胞;瓸赴诙啾短逑赴明显增加,流式细胞仪检测显示多倍体细胞占瓸赴俜直的.%,并且随着代龄的增加有增多的趋势。转化细胞形状因子趋近于异形指数降低,较正常细胞面积大,多核仁深染,胞浆丰富,膜状复层生长,边缘里不规则形向外扩展,
堑塞圭丝鱼堂苤董塑生盔堂塑±堂垡迨塞⒐。砉腂赴⒘四茉谔逋獬て诖ù,转化细胞呈现复层生长、细胞周期中各期细胞百分比改变,细胞周期向诤虶疢期推进、软琼脂克隆形成率增高、转化细胞内多倍体细胞增加且生长速度加快。均证实细胞已经发生转化并有恶性化趋势。结论:⒒钚匝跏荂韵赴毙远拘允鄙傻闹饕2镏唬崾九氲饔烟冷凝物诱发的细胞转化可能与其产生的活性氧有关。⒔盏嫉娜酥苌掀は赴裥宰;南赴P盏嫉南赴;且桓鼋ソ缘墓獭关键词:
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引言并、二苯并鬏、苯【坑讲蒽笛榻峁飨陨摺珼损伤实验【俊笛椤】、微核实验不竦立的人胚肺成纤维细胞的转化模型,对细胞形态的改变、生长速度加快等改堑塞垒丝垒壅塞董蜜堡盔堂堡主堂堡丝塞肿瘤是目前严重威胁人类健康的重要疾病之~。随着工业革命和科技发展,人类生存环境发生很大变化,人类虽然对其它疾病的控制能力有了显著提高,但由环境中存在的各种化合物引发的各种肿瘤却更加难以控制,这使人类肿瘤的发病呈现有增无减的趋势。围绕着肿瘤的发病机制、治疗和预防措施的相关研究,一直是医学研究的重点。我国素有高温烹调食物的****惯,烹调油烟成为我国室内空气污染重要来源之一。烹调油烟与肺癌的关系日益受到入们的重视。烹调油烟珻鞘秤糜驮谂氲骷游鹿讨胁的油性烟雾,其成分复杂,在时可产生致癌性杂环***类化合物,苯苯并】芘榷嗷贩继嗷衔飔“。当前对烹调油烟的研究主要集中于流行病学调查和动物实验。流行病学调查显示:女性肺鳞癌与腺癌的发生和吸入的泄兀喽晕O斩任..欢锸笛檠芯勘砻鳎篊可以引起大鼠肺,肝等加合物的含量增加秤糜驮诩尤鹊℃时产生的哂兄峦槐浠钚裕泄质骎细胞在加入组分后与饔阳性结果。由于某煞指丛樱胰擞攵镏浯嬖谥质舨钜欤钟械动物研究结果外推至人,还存在着一定困难。同时,细胞来源的不同,使研究结论的可信性无法完全确定,因此***死喾伟┑幕迫圆惶宄体外细胞转化是从细胞和分子水平研究癌变机制的重要手段,细胞受致癌物作用后,可造成多个靶部位的损伤,从而引起细胞结构,细胞遗传、细胞分子等多层次的改变,这些改变及细胞恶性转化和肿瘤形成一个复杂调控网络。过去研究多是利用啮齿类动物细胞和入成纤维细胞为观察对象。已建变进行了报道?墒侨死喾尾恐琢テ鹪从谏掀は赴珻主要作用的靶器官也是呼吸道上皮,上皮细胞的代谢、修复和分化等功能与成纤维细胞有明显的不同。假如利用人呼吸道上皮细胞为研究对象来研究闹掳┗
堑塞生丝垒堂蓥蒸童望盔堂堡圭芏垡逢塞理,则更能模拟人类肺癌实际发生的形式。人呼吸道上皮细胞又具有将前致癌物代谢活化为具有活性的终致癌物的细胞色素氧化嗝赶担杂谘芯前致癌物更有意义。但是原代人支气管上皮细胞在体外很难连续传代培养多个倍增期薹愠て诼灾掳┗硌芯浚郎娜酥上皮细胞能够连续传代代以上梢