VERO细胞培养ppt课件.ppt

细胞培养1cellculture*细胞培养技术从生物体内取出组织或细胞,在体外(invitro)模拟体内生理环境,在无菌、适当温度和一定营养条件下,对这些组织或细胞进行孵育培养,使之保持一定的结构和功能,以便于我们观察研究,这种方法就是细胞培养(cellculture)。有时细胞培养也称为组织培养(tissueculture)。*细胞培养目的和用途1、科学研究(1)药物研究开发,如新药筛选,疫苗、基因工程药物、细胞工程、药物研究与开发、单克隆抗体制备等(2)基础研究,如药物作用机理、基因功能、疾病发生机理等研究2、生物制药(1)疫苗生产:如病毒性疫苗(肝炎病毒疫苗、艾滋病疫苗等),多肽疫苗(肿瘤疫苗)等(2)基因工程药物生产:如EPO等(3)抗体药物、基因治疗药物生产(4)细胞工程药物生产:生物细胞内的一些生物活性多肽,生物活性物质等(5)利用细胞法体外测定生物活性物质的活性;并预测其在体内的药效和替代体内法检测其成品的生物活性*主要内容基本概念准备工作培养用液基本技术污染及防治肿瘤细胞的培养参考资源*基本概念*初代培养(primaryculture)又称原代培养,即直接从体内取出的细胞、组织和器官进行的第一次的培养物,一般持续1-4周。一旦已进行传代培养(Subculture)的细胞,便不再称为初代培养,而改称为细胞系。传代培养(subculture/passage)细胞在培养器皿中生长一定时间后,被分开接种到新的培养器皿中,一般情况下可传代10-50次。也是一种将细胞种保存下去的方法。同时也是利用培养细胞进行各种实验的必经过程。克隆(clone)从一个细胞靠有丝分裂获得的一个细胞群体(population)从一个经过生物学鉴定的细胞系用单细胞分离培养或通过筛选的方法,由单细胞增殖形成的细胞群,称细胞株(strain)再由原细胞株进一步分离培养出与原株性状不同的细胞群,称为亚株(Substrain)*cellline:原代培养物经首次传代成功后即成为细胞系。如果不断继续传代或传代数有限,可称为有限细胞系(finitecellline)如果可以连续传代,则可称为连续细胞系(continouscellline)或无限细胞系(InfiniteCellLine)有恶性的无限细胞系:“恶性转化细胞系”只具永生性而无恶性的细胞系:无限细胞系或转化细胞系:NIH3T3、Rat-1细胞系*细胞株cellstrain:由原代培养中,用选择或克隆,选出具有特征标记的细胞,经传代形成细胞株。如果不能继续传代或传代数有限,称为有限细胞株(finitecellstrain)如果可以连续传代,称为连续细胞株(continuouscellstrain)。*细胞周期指细胞一个世代所经历的时间从一次细胞分裂结束到下一次分裂结束为一个周期反应细胞增殖速度*体外培养细胞的种类和命名肿瘤细胞系多由癌瘤建成,多呈类上皮型细胞,常已传几十代或百代以上,并具有不死性和异体接种致瘤性。细胞的命名无严格统一规定,多采用有一定意义缩写字或代号表示几种代表性的细胞名称:HeLa:供体患者的姓名(来源于宫颈癌)CHO:中国地鼠卵巢细胞(ChineseHamsterOvary)宫-743:宫颈癌上皮细胞,1974年3月建立NIH3T3:美国国立卫生研究所(NationalInstituteofHealth)建立;每3天传代,每次接种3×105细胞/ml*