农杆菌注射渗透法转化烟草实验研究..doc

ISSN1002-11-2034/,张以顺(中山大学生命科学学院生物学实验教学中心,广东广州510275)摘要:利用携带植物表达载体质粒pCambia2301的农杆菌菌株,通过注射渗透法对烟草叶片进行感染转化,组织化学染色检测GUS报告基因瞬时表达的结果表明,~,感染时间72h以上可使瞬时表达的阳性检出率达到100%,农杆菌菌株EHA105比LBA4404表现出更强的转化活性。关键词:烟草;瞬时转化;根癌农杆菌;渗透法中图分类号:;S572文献标志码:A文章编号:1002-4956(2010)11-0050-03Studyonagrobacteriumtumefaciens-obyinfiltrationLiYin,ZhangYishun(BiologyExperimentTeachingCenter,SchoolofLifeSciences,SunYat-senUniversity,Guangzhou510275,China)Abstract:oepidermalcellsisperformedbytheagrobacter-iumtumefaciens----pressionisupto100%:o;transienttransformation;agrobacteriumtumefaciens;infiltration植物的遗传转化是生物技术中的一个十分重要的领域,烟草作为重要的模式植物是最早实现基因转化和应用的植物之一。植物转化的常用方法有农杆菌介导法、基因枪法等。使用农杆菌介导的叶片注射渗透法转化烟草进行基因瞬时表达,是近几年来在基因功能检测、蛋白作用机理研究方面使用较多的快速转化技术[1-2],该技术的最大优点是方便快捷,感染组织面积大,转化细胞数量多[3]。我们在近年的实验教学中引入这一实验技术,不仅能避免通过组织培养的转化方法的耗时长、操作复杂、容易污染等问题,还可以在较短时间内完成从转化到报告基因表达检测的过程。收稿日期:2009-12-22修改日期:2010-03-18基金项目:中山大学教学改革项目(1163125);中山大学实验教学研究(改革)基金项目(YJ200921)作者简介:黎茵(1969)),女,广东省梅县人,博士,讲师,研究方向:-mail:liyin