磁激活细胞分离术用于胃癌循环血微转移的研究.pdf

复旦大学
硕士学位论文
磁激活细胞分离术用于胃癌循环血微转移的研究
姓名:温玉刚
申请学位级别:硕士
专业:外科学
指导教师:李克
20040501
磁激活细胞分离术用于胃癌循环血微转移的研究中文摘要方法:手术前抽取例胃癌患者和哉照叩耐庵苎#质踔星谐结果:在未经磁激活细胞分离术富集的标本中较少发现は赴结论:磁激活细胞分离术能有效地富集上皮来源细胞,提高上皮源细胞的关键词:磁激活细胞分离术;胃癌;微转移;游离癌细胞;流式细胞仪目的:通过用磁激活细胞分离术对不同病理分期的胃癌病人周围血和门静脉血中十上皮细胞的富集及检测,探讨胃癌的微转移情况以判断化疗的合理途径、时机、疗效及胃癌术后复发机制。掀は赴昧魇较赴羌觳馄浜浚⒈冉衔赴┳橛攵哉兆橐约安同肿瘤分期之间、磁富集前后掀は赴康牟钜臁1冉贤庵苎<懊静脉血中游离掀は赴钜臁在经富集的标本中其含量在胃癌组与对照组以及分期獻谟隝检出率,并能反映血循环系统游离癌细胞数量;上皮细胞数量与胃癌的存在及临床病理分期密切相关,对判断肿瘤转移、预后及选择化疗合理途径、时机、监测疗效有指导意义。瘤前取其门静脉血,分别标记带磁珠的细胞角蛋白抗体,经磁柱富集~Ⅳ期患者之间差别有非常显著的意义。门静脉血中游离掀は赴例高于外周血。磁撇活细胞分离术用十胃癌微转移的研究
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前言壁堂垩型堕坌堕查里±亘塑堂堑鳖堕塑里减少复发,但疗效并不令人满意。复发源于腹膜种植者占%,源于肝脏及其它远处血行转移者占%。由此可见减少腹腔内复发及血行转移是提成熟的检测和分析外周组织中播散性肿瘤细胞的技术,才能为转移的早期那么理想的检测敏感度应该是能在上述标本量中找到至少一个肿瘤细胞,也就是说应能在×鲇泻讼赴×龉撬柘赴姓业揭桓鲋琢分析、、、免疫细胞化学、土魇较赴羌觳獾龋行富集以提高浓度。目前有两种方法,一种是梯度离心法,这种方法特异自从采用广泛淋巴结清扫的胃癌根治术以来,胃癌的预后有了一定的改善,但仍有%患者最终死于肿瘤的复发。虽然目前有各种化疗方案以高胃癌疗效迫切需要解决的问题。隐匿性肿瘤细胞的播散是引起肿瘤复发并导致患者死亡最重要的原因,最近的研究表明在骨髓、外周血以及淋巴液等外周组织中发现游离的肿瘤细胞是判断肿瘤转移性复发的~个独立预后指标,检测并消除肿瘤病人体内微转移病灶也是目前临床肿瘤学的研究重点之一。所以只有发展出~般如果要在外周血或的骨髓中检测转移性的肿瘤细胞,细胞Ⅲ。随着生物探测技术的发展,己为检测血循环中的微量转移癌细胞及腹腔内游离癌细胞提供了可能。目前有许多检测方法,如光学显微镜、基因其灵敏度各不相同。大部分方法只能用来分析相对较小的标本,比如~张玻片上大约只能铺上个细胞,如果通过光镜寻找,无论是免疫细胞化学染色还是免疫荧光染色,要筛查多达×鲇泻讼赴难荆要观察挪F匀恍史浅5拖隆@么蟛糠侄裥陨掀ぴ葱韵赴表达细胞角蛋白,奶氐悖每瓜赴堑鞍固灞记分离胃癌细胞并用技术,已能测定出周围血循环及淋巴结内微量转移癌细胞。但此法难以测定小于石的肿瘤细胞,且有相当的假阳性。所以为了提高检测的灵敏度和分析能力,只有对外周组织中的肿瘤细胞进诊断和治疗打下基础。
性差,且有可能丢失部分肿瘤细胞。另一种方法是将欲分离的细胞用磁珠偶联于抗体,富集和分离所标记的细胞,再用流式细胞仪等方法进行检测,检测将更敏感且纯度更高同时也能达到足够量。的原理是通过抗体对细胞膜表面抗原的特异识别,将偶联在抗体上的磁珠标记在细胞上而分离细胞。它可以收集高含量的细胞也可富测和定量转移的癌细胞。此外分离纯度高,可达%,且细胞处理量大,可达4胖椴挥跋煜赴盍Γ使细胞保持生理活性。细胞分离后可保持无菌,可以培养。疗效及改善预后具有重要意义。本研究利用对胃癌病人外周血和门静脉血中游离癌细胞富集测定,为临床对胃癌病人微转移的检测及选择合理的化疗时间、方案和途径等提供理论依据及方法,并可监测治疗效果。有较高的临床应用价值。集微量细胞,可将一陌┫赴患倍,达到。水平,因此可检早期检测播散的癌细胞,进而采取有效的阻断治疗,对提高胃癌临床磁激活细胞分离术用于胃癌微转移的研究
磁激活细胞分离术用于胃癌循环血微转移的研究文引言正性肿瘤细胞播散引起的复发。转移过程中的微转移肿瘤细胞的检测和分离比较困难。最近研究表明,在外周组织如骨髓、外周血以及淋巴液中发现分【被认为是检测循环中癌细胞的敏感标记物‘。本研究尝试用磁激游离的肿瘤细胞是判断肿瘤转移性复发的一个独立预后指标,检测并消除肿瘤患者体内微转移病灶是目前临床肿瘤学的研究重点之一。当前需要研发有实用价值的检测和分离微转移肿瘤细胞的技术,用于外周播散的肿瘤细胞的分离,对研究肿瘤的微转移机制以及诊断和治疗有重要意义。细胞