HN1家族基因和PNO1基因的克隆和功能初步研究.pdf

复旦大学
博士学位论文
HN1家族基因和PNO1基因的克隆和功能初步研究
姓名:周光金
申请学位级别:博士
专业:遗传学
指导教师:赵寿元
20031225
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,序列分析表明这两个转录本是由不同的加尾剪接而析稳定表达娜烁伟┫赴甑南赴至阎芷谔卣鳎砻鱄表达对肝癌细胞有显著的谧柚偷男вΑMü湍杆咏环椒ǎ谌烁蝒目庵猩秆〉搅一个与嗷プ饔玫腇凋亡相关蛋白的克隆,通过免疫共沉淀和细胞基因位于人染色体,由五个外显子和四个内含子组成。。通过特异引物主要激活与细胞周期相关信号通路的报告基因。文献报道在多种疾病中号染色体上附近的序列经常有缺失的现象,的蛄卸辔V琢鲎橹丛矗编码一个霭被岬亩嚯摹转录产生和一的两个转录本,成的。谙赴诒泶镆桓牡鞍祝琀蛋白在细胞中定位在细胞核内。通过治龊吞匾煲锢┰龅姆椒ǎ颐腔狗⑾諬至少在肝、脑等组织通过不同剪接方式产生三个不同长度的差异剪接体。赴谐量表达主要激活与细胞增殖和分化相关的信号通路报告基因表达。流式分析仅分共定位的方法验证了虵南嗷プ饔谩可能和相互作用并参与揪兜南赴蛲龉獭分别为,一。三个转录本在人中组织中广泛表达。序列特征分析表明,,的方法从人肝等组织中验证了这个鐾庀宰蛹艚颖镜拇嬖凇泶镆桓牡鞍祝贖赴诠惴悍植荚谙赴屎拖赴恕赴提示可能和肿瘤等疾病相关。我们预测和鉴定了个鯤闹旨渫椿蚝个加工型假基因。虷鞍仔蛄斜榷浴⒔鞣治霰砻鳎琀虷可能起源于共同的古老祖先,辉诩棺刀镏写嬖冢恕⒑谛尚珊秃愫雍锏腍蛋自具家族基因的克隆和功能研究
和小鼠中各有两个假定的高度一致的删儿基因。易寤虻鞍譵预测表相关登陆号有相同的序列。诎ń湍浮⒑5ǖ鹊偷壬锏礁叩榷参镏卸加写嬖冢笫明鞍仔蛄兄械牧礁鰉和中的两个恢谜孟喾础N颐墙虷认喙氐幕蛲吵莆狧家族,易宄稍痹诨蜓莼芯哂懈度保守性。关键词:琀現J匦裕鞍紫嗷プ饔易寤虻目寺『凸δ苎芯第一部分,,一珹籄——
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前言置、结构和碱基组成都可以通过搜索基因信息数据库而获取,这就大大便利了基因的分析研究工作。利用这些资源和信息,近几年来我们实验或同源基因信息,从而可以将这些未知的进行分类分一步深入探讨提供方向。然而,基因组测序完成后仍然有相当一部分未P∈驢定位在号染色体上,长葑橹泶锾卣魍撇釮基因可能在胚胎发育过程中与造血细胞和神经细胞的分化有联系。扔么砹鲎B急镜方法检测了小鼠胶质细胞瘤细胞株幕虮泶锼剑峁砻鱄同在胶质细胞中表达,提示胶质神经细胞有可能来源于造血细胞的分化扔蒙窬0坝盏糚赴大鼠嗜镉神经母细胞瘤,因之一U飧龇⑾痔崾荆琀基因可能与神经细胞的分化和凋亡过程有关。赡苁窃煅:蜕窬赴泶锏奶卣骰蛑弧在我们实验室参与国际竞争获取人类新基因克隆的工作中,随着人类基因组计划的完成,人类基因组上大部分编码基因的位室通过数据挖掘和同源分析研究策略获得了不少新的片段。通过查询国际上已经建立的各种基因信息数据库,这些片段中的大部分的编码蛋白可以找到一些相关的结构域信息析或根据“同源相似或相近”的规律预测可能的功能和生理意义,为进知还没有太多的结构域数据来源和同源基因信息,从而可以通过数据挖掘和多种途径加以探讨。本部分论文报道了一个全新的没有已知结构域信息的新基因家族一易宄稍钡目寺『推涔δ艿某醪教教帧年,等从小鼠天的卵黄囊血岛来源的循环红细胞组织文库中分离了的一个新的基因,该基因在小鼠的胚胎和成年造血和神经组织中表达很高,所以被命名为和造血细胞和内胚层结构特征表达的蛋白、月』、蛈一一种标准的神经元细胞系蛲觯ü齝咄可秆∮肷窬胞凋亡相关的调控基因。在代表个的克隆中,有鲇盏前后表达量差异显著的克隆,其中发现窍碌倍表达的基用小鼠娜ǔ搜索的人类菘猓ü鼸度为,鮏并结合—易寤虻目寺『凸δ苎型第一部分
材料和方法一、材料税被嵝蛄型吹牧硪桓龌颍I尽籰尽弧。希望进一步获取同源关系信息,我们利用近几年来各种模法,我们比较研究了删』和的初步功能特征。,质粒载体,宿主菌和细胞株登陆为。搜索蚐等其它各种数据库,缓的虷虻牡鞍仔蛄蟹治霰冉媳砻髡饬礁龌虻闹旨渫吹预测、进化分析,信号通路检测,细胞周期和筛选相互作用的分子等方拼接的方法获得了一个与小鼠基因同源的片段,用特异引物从人的各种组织中扩增该片段,结果从