一种利用硫酯酶合成Cilengitide的方法.docx

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0min90%。[0050]催化后的Cilengitide产物,线性水解Cilengitide及剩余底物均能与标准品的液相出峰时间相一致(图1),(计算值),催化反应产物中的实际观察值为=。(计算值),(表1)。为进一步验证催化产物是否为Cilengitide,分别对Cilengitide标准品、线性肽标准品以及催化后的产物进行MS-MS分析,如图2、3、4和5所示。在40v能量的攻击下,标准品Cilengitide和催化产物中均有特征离子碎片:/,所以从一级和二级数据均能证实该催化产物为Cilengitide。对序列为SEQIDNO:1的酶进行人工合成,其也具有上述的催化合成Cilengitide的能力,催化效果也与重组表达的酶一致。[0051]表1:催化产物的一级质谱数据[0052]【权利要求】,其特征在于,是在合成Cilengitide中的应用。,其特征在于,,其特征在于所述的底物为L-asp-D-phe-N-met-L-val-L-arg-,其特征在于所述的底物的C端连接了BMT。,其特征在于所述的硫酯酶,包含有:1)氨基酸序列为SEQIDNO:1的酶;2)与I)中的酶具有同源性,且能用来催化用于合成Cilengitide的底物来合成Cilengitide的硫酯酶。,其特征在于所述的2)中的同源性,为具有90%以上同源性。