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DEK蛋白真核表达纯化及其活性检测的中期报告.docx
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DEK蛋白真核表达纯化及其活性检测的中期报告.docx
该【DEK蛋白真核表达纯化及其活性检测的中期报告 】是由【niuww】上传分享,文档一共【1】页,该文档可以免费在线阅读,需要了解更多关于【DEK蛋白真核表达纯化及其活性检测的中期报告 】的内容,可以使用淘豆网的站内搜索功能,选择自己适合的文档,以下文字是截取该文章内的部分文字,如需要获得完整电子版,请下载此文档到您的设备,方便您编辑和打印。DEK蛋白真核表达纯化及其活性检测的中期报告本实验的目的是在真核系统中表达、纯化和鉴定DEK蛋白。在本次中期报告中,我们主要完成了以下工作:。我们在真核表达载体pEGFP-N1上将DEK基因克隆下来,并用PCR验证确保插入物的正确性。然后将质粒转染至HEK293细胞中,通过Westernblot验证DEK蛋白的表达。。我们首先尝试了离心、胶体共沉淀和磷酸铵盐沉淀等不同方法对细胞进行裂解,最终选择了超声波破碎法获得更高的蛋白质产量。接着,我们使用柱层析法对DEK蛋白进行纯化,最终获得了高纯度的DEK蛋白。。我们采用EMSA实验和人AbsorbanceDetectionKit进行了DEK蛋白的两项物质上的检测,并得到了可信的结果。其中,EMSA实验表明得到的DEK蛋白能够结合目的DNA,证明DEK蛋白的功能性完整;而AbsorbanceDetectionKit实验则表明获得的蛋白质浓度较为稳定,可用于后续实验。。我们以DEK全长蛋白作为抗原,进行小鼠的免疫和巨细胞瘤的制备。接着进行ELISA、Westernblot和免疫荧光实验鉴定,得到多个DEK单克隆抗体株系。总体来说,我们已经成功在真核系统中表达、纯化和鉴定了DEK蛋白,并制备了多种单克隆抗体,为后续DEK蛋白的进一步研究奠定了基础。
DEK蛋白真核表达纯化及其活性检测的中期报告 来自淘豆网www.taodocs.com转载请标明出处.
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