环境微生物实验报告.doc

该【环境微生物实验报告 】是由【世界末末日】上传分享，文档一共【30】页，该文档可以免费在线阅读，需要了解更多关于【环境微生物实验报告 】的内容，可以使用淘豆网的站内搜索功能，选择自己适合的文档，以下文字是截取该文章内的部分文字，如需要获得完整电子版，请下载此文档到您的设备，方便您编辑和打印。东南大学环境系课程名称:环境微生物实验报告指导老师:曾苏学号:03208707姓名:王霞同组姓名:徐蕾、周亚妮,第二组,成绩:日期:2010年12月17日实验一、显微镜的使用及微生物形态的观察一、实验目的:1、学****普通光学显微镜的使用方法。2、认识原生动物等微生物的形态。二、实验原理:(一)显微镜的构造普通光学显微镜的构造可分为两大部分:一为机械装置,一为光学系统。?机械装置(1)镜座:是显微镜的底座,用以支持整个镜体。(2)镜柱:是镜座上面直立的部分,用以连接镜座和镜臂。(3)镜臂:一端连于镜柱,一端连于镜筒,是取放显微镜时手握部位。(4)镜筒:连在镜臂的前上方,镜筒上端装有目镜,下端装有物镜转换器。(5)物镜转换器(旋转器):接于棱镜壳的下方,可自由转动,盘上有3,4个圆孔,是安装物镜部位,转动转换器,可以调换不同倍数的物镜,当听到碰叩声时,方可进行观察,此时物镜光轴恰好对准通光孔中心,光路接通。转换物镜后,不允许使用粗调节器,只能用细调节器,使像清晰。(6)镜台(载物台):在镜筒下方,形状有方、圆两种,用以放置玻片标本,中央有一通光孔,我们所用的显微镜其镜台上装有玻片标本推进器(推片器),推进器左侧有弹簧夹,用以夹持玻片标本,镜台下有推进器调节轮,可使玻片标本作左右、前后方向的移动。(7)调节器:是装在镜柱上的大小两种螺旋,调节时使镜台作上下方向的移动。?粗调节器(粗螺旋):大螺旋称粗调节器,移动时可使镜台作快速和较大幅度的升降,所以能迅速调节物镜和标本之间的距离使物象呈现于视野中,通常在使用低倍镜时,先用粗调节器迅速找到物象。?细调节器(细准焦螺旋):小螺旋称细调节器,移动时可使镜台缓慢地升降,多在运用高倍镜时使用,从而得到更清晰的物象,并借以观察标本的不同层次和不同深度的结构。?光学系统装在镜台下方,包括反光镜,集光器。(1)反光镜:装在镜座上面,可向任意方向转动,它有平、凹两面,其作用是将光源光线反射到聚光器上,再经通光孔照明标本,凹面镜聚光作用强,适于光线较弱的时候使用,平面镜聚光作用弱,适于光线较强时使用。(2)集光器(聚光器)位于镜台下方的集光器架上,由聚光镜和光圈组成,其作用是把光线集中到所要观察的标本上。?聚光镜:由一片或数片透镜组成,起汇聚光线的作用,加强对标本的照明,并使光线射入物镜内,镜柱旁有一调节螺旋,转动它可升降聚光器,以调节视野中光亮度的强弱。?光圈(虹彩光圈):在聚光镜下方,由十几张金属薄片组成,其外侧伸出一柄,推动它可调节其开孔的大小,以调节光量。(3)目镜:装在镜筒的上端,通常备有2,3个,上面刻有5×、10×或15×符号以表示其放大倍数,一般装的是10×的目镜。目镜的作用是把物镜放大了的实像再放大一次,并把物像映入观察者的眼中。目镜的结构较物镜简单,普通光学显微镜的目镜通常由两块透镜组成,上端的一块透镜称“接目镜”,下端的透镜称“场镜”。上下透镜之间或在两个透镜的下方,装有由金属制的环状光阑或叫“视场光阑”,物镜放大后的中间像就落在视场光阑平面处,所以其上可安置目镜测微尺。普通光学显微镜常用的目镜为惠更斯目镜(Huygenseyepiece),如要进行研究用时,一般选用性能更好的目镜,如补偿目镜(K)、平场目镜(P)、广视场目镜(WF)。照相时选用照相目镜(NFK)。(4)物镜:装在镜筒下端的旋转器上,一般有3,4个物镜,其中最短的刻有“10×”符号的为低倍镜,较长的刻有“40×”符号的为高倍镜,最长的刻有“100×”符号的为油镜,此外,在高倍镜和油镜上还常加有一圈不同颜色的线,以示区别。显微镜的放大倍数是物镜的放大倍数与目镜的放大倍数的乘积,如物镜为10×,目镜为10×,其放大倍数就为10×10=100。(二)、光学显微镜的成像原理显微镜的放大是通过透镜来完成的,单透镜成像具有像差,影响像质。由单透镜组合而成的透镜组相当于一个凸透镜,放大作用更好。三、实验器材:1、显微镜、载玻片、盖玻片、擦镜纸等。2、微生物标本片。3、香柏油、二甲苯。四、实验步骤:,窗外不宜有障碍视线之物。,把低倍镜移到镜筒正下方,和镜筒连接并对直。。同时用眼对准接目镜(适当放大倍数的接目镜)仔细观察,使视野完全成为白色,这是光线已经通到镜里的表示。,要观察的标本放到圆孔的正中央“+”。,同时眼睛注视接物镜,以防接物镜和载玻片相碰。。,同时左眼向接目镜里观察。如标本显出,但不十分清楚,可用细调节器调节,至标本完全清晰为止。,致使超过焦点,标本不能出现时,不应在眼睛注视接目镜的同时向下旋转粗调节器,必须从第(5)步做起,以防因没有把握的旋转,使接物镜与载玻片碰触。,最好两眼都能同时睁开。如用左眼看显微镜,右眼看桌上纸张,便可一面看一面画出所看到的物象。,先用低倍镜检查,把要观察的标本放到视野正中。。当高倍镜移动到载玻片时,往往镜头十分靠近载玻片。这时必须注意是否因高倍镜靠近的缘故而使载玻片也随着移动。如果载玻片有移动的现象,则应立刻停止推动回转板,把高倍镜退回原处,再按照使用低倍镜的使用方法,校正标本的位置,然后旋动调节器,使镜筒稍微向上,再对换高倍镜。,向镜内观察所显现的标本,往往不很清楚,这时可旋转细调节器,上下移动,但不要过分移动。:(1)以粗调节器调开油镜,移去标本片。(2)用擦镜纸擦去油镜上的香柏油。如油过粘、过干,可以擦镜纸沾少许二重瓶外层的二甲苯擦镜,然后立即用干擦镜纸擦去残留二甲苯,以免镜头脱胶。(3)加少许二甲苯于滴过油的标本上,以毛边纸向一个方向轻轻拖拉,除去标本上的油。一次不行可重复,但不可来回擦抹,以免擦掉标本。(4)将显微镜各部分还原:聚光器下降,反光镜垂直于镜座,物镜镜头离开通光孔上方转成八字形。放入镜箱。五、实验结果与讨论一)实验结果二)分析讨论1、在此次试验中,我们基本掌握了显微镜的构造和使用功能,学****与掌握了显微镜观察微生物的方法,也观察了伞菌、草履虫、新月藻等多种微生物形态,认识了原生动物等微生物的形态。2、在观察时要先用低倍镜观察,以使待观察的标本放到视野的正中,在观察时有些微生物个体较大,仅用低倍镜就可以看清整个结构,如伞菌、新月藻等,有些用高倍镜观察也不能看清微生物的结构,此时要需要使用油镜,如枯草杆菌、炭蛆杆菌等。实验二、微生物大小的测量一、实验目的1、学****并掌握用测微尺测定微生物大小的方法;2、利用显微镜测微尺测定草履虫的大小,增强对微生物细胞大小的感性认识;二、实验原理微生物细胞的大小是微生物重要的形态特征之一,也是分类鉴定的依据之一。由于菌体很小,只能在显微镜下来测量。微生物大小的测定需要在显微镜下借助特殊的测量工具——镜台测微尺和目镜测微尺。由于不同的物镜和目镜组合的放大倍数不同,目镜测微尺每小格所代表的实际长度也不一样。因此,用目镜测微尺进行大小测定时必须用镜台测微尺进行校正,以求出该显微镜在一定放大倍数的目镜和物镜下,目镜测微尺每小格的相对长度,然后根据微生物细胞相当于目镜测微尺的格数,即可以计算出细胞的实际大小。目镜测微尺是一块圆形玻片,其中央刻有精确的刻度,有等分50小格或100小格两种,每5小格间有一长线相隔。测量时,将其放在接目镜中的隔板上(此处正好与物镜放大的中间像重叠)来测量经显微镜放大后的细胞物象。由于不同目镜、物镜组合的放大倍数不相同,目镜测微尺每格实际表示的长度也不一样,因此目镜测微尺测量微生物大小时须先用置于镜台上的镜台测微尺校正,以求出在一定放大倍数下,目镜测微尺每小格所代表的相对长度。镜台测微尺是中央部分刻有精确等分线的载玻片,一般将lmm等分为100格,每格长l0μm(),是专门用来校正目镜测微尺的。校正时,将镜台测微尺放在载物台上,由于镜台测微尺与细胞标本是处于同一位置,都要经过物镜和目镜的两次放大成像进入视野,即镜台测微尺随着显微镜总放大倍数的放大而放大,因此从镜台测微尺上得到的读数就是细胞的真实大小,所以用镜台测微尺的已知长度在一定放大倍数下校正目镜测微尺,即可求出目镜测微尺每格所代表的长度(即目镜测微尺每格长度/μm=两条重合线间镜台测微尺的格数×10/两条重合线间目镜测微尺的格数),然后移去镜台测微尺,换上待测标本片,用校正好的目镜测微尺在同样放大倍数下测量微生物大小。三、实验器材1、活材料:草履虫染色标本片。2、器材:显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、盖玻片、载玻片、双层瓶、擦镜纸等。四、实验步骤1、目镜测微尺的标定(1)放置目镜测微尺:取出接目镜,旋开接目镜透镜,将目镜测微尺的刻度朝下放在接目镜筒内的隔板上,旋上接目透镜,将接目镜插入镜筒内。(2)放置镜台测微尺将镜台测微尺置于显微镜的载物台上,使刻度面朝上。(3)校正目镜测微尺先用低倍镜观察,对准焦距,当看清镜台测微尺后,转动接目镜,使目镜测微尺的刻度与镜台测微尺的刻度平行,移动推动器,使目镜测微尺和镜台测微尺的某一区间的两对刻度线完全重合,然后计数出两对重合线之间各自所占的格数。注意:由于不同显微镜及附件的放大倍数不同,因此校正目镜测微尺必须针对特定的显微镜和附件(特定的物镜、目镜、镜筒长度)进行,而且只能在特定的情况下重复使用,当更换不同放大倍数的目镜或物镜时,必须重新校正目镜测微尺每一格所代表的长度。2(菌体大小的测定目镜测微尺校正后,移去镜台测微尺,换上草履虫染色玻璃片标本,校正焦距使菌体清晰,转动目镜测微尺,测出草履虫的长和宽各占几小格,将测得的格数乘以目镜