紫外-可见分光光度法习题(答案与解析).docx

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),显色反应应选择的条件有 ( )( )前者使用广泛,后者适用范围小后者是由分子外层价电子跃迁引起前者谱图信息丰富,后者则简单前者是分子振动转动能级跃迁引起二、,吸光度为纵坐标的浓度不同 KMnO4溶液吸收曲线上可以看出__________未变,只是__________改变了。,其吸光度随浓度增大而 __________,但最大吸收波长__________。.符合光吸收定律的有色溶液,当溶液浓度增大时,它的最大吸收峰位置__________,摩尔吸光系数__________。,吸光度应控制在~范围内,可采取措施有__________和__________。 __________的度量,其值愈__________,表明该显色反应愈__________。,使*吸收带向__________方向移动,这是因为产生__________共轭效应。,在比色皿厚度为2cm时,测得吸光度为。如果浓度增大1倍时,其吸光度A=__________,T=__________。,可用(1)H2O2法(=102Lmol-1cm-1),也可用(2)二***替比啉甲烷法(=104Lmol-1cm-1)。当测定试样中钛含量较低时,用__________法较好。9依据;同种物质的不同浓度溶液,任一波长处的吸光度随物质的浓度的增加而增大,这是物质__________的依据。,它 与__________、__________及__________无关。.符合朗伯特比耳定律的2+邻菲罗啉显色体系,当Fe2+浓度c变为3c时,A将11Fe__________;T将__________;将__________。 A1,稀释后在相同条件下,测得吸光度为 A2,进一步稀释测得吸光度为A3。已知A1A2=,A2A3=,则T3T1为__________。,偏离朗伯特比耳定律的重要原因是入射光的 __________差和吸光物质的__________引起的。,入射光波一般以选择 __________波长为宜,这是因为__________。, 应选__________为参比溶液;如试样中其他组分有吸收,但不与显色剂反应,则当显色剂无吸收时,可用 __________作参比溶液。,其特征是波长__________;K带是由 跃迁引起,其特征是波长__________。-可见分光光度法中,工作曲线是__________和__________之间的关系曲线。当溶液符合比耳定律时,此关系曲线应为 __________。,常因波长范围不同而选用不同材料制作的吸收池。可见分光光度法中选用__________吸收池;紫外分光光度法中选用 __________吸收池;红外分光光度法中选用__________吸收池。三、,则表明该物质的浓度越大。,同一物质,浓度不同,入射光波长相同,则摩尔吸光系数相同;同一浓度,不同物质,入射光波长相同,则摩尔吸光系数一般不同。,所以透光率与溶液的浓度成反比关系;有色溶液的吸光度随着溶液浓度的增大而增大,所以吸光度与溶液的浓度成正比关系。,浓度 C与吸光度A之间的关系是通过原点的一条直线。。。,溶液浓度越大,吸光度越大,测量结果越准确。,只与该有色物质的结构特性有关,与入射光波长和强度无关。、显色剂、缓冲溶液等有吸收,可选用不加待测液而其他试剂都加的空白溶液为参比溶液。,值越大,表明测定结果的灵敏度越高。,读数误差不同,引起最大读数误差的吸光度数值约为。,可以用手捏吸收池的任何面。,若向该溶液中通 NH3时,其摩尔吸光系数不发生改变。。15.***在已烷中的紫外吸收 max为279nm,max为 Lmol-1cm-1。引起该吸收带跃迁是*。 2%~5%。使用这类方法可进行微量组分分析,因为它能满足测定微量组分对准确度的要求。。四、有关概念及名词解释五、 236,将其配成100mL含安络血 mg的溶液,盛于1cm吸收池中,在λmax=55nm处测得A值为,试求安络血的E11cm%和ε值。,准确量取此溶液mL稀释至100mL,取此溶液于1cm吸收池中,在λmax=245nm处测得A值为。求样品中维生素C的百分质量分数。(E11cm%560mL/gcm) g,用mol/LHCl稀释,配制成 250mL。准确吸取 mL,稀释至100mL,以mol/LHCl为空白,在253nm处用1cm吸收池测得T=%,其ε=12000L/molcm),被测组分的分子质量=,试计算 E11cm%(263nm)和试样中被测组分的百分质量分数。,取血清试样于 100mL量瓶中,加显色剂显色后,稀释至刻度。吸取该试液,测得吸光度为;另取该试液,加磷酸盐,测得吸光度为。计算每毫升血清中含磷酸盐的质量。,用mol/L的HCl溶解后,转移至100ml容量瓶中用同样HCl稀释至刻度。吸取该溶液mL,再稀释至100mL。取稀释液用2cm吸收池,在310nm处进行吸光度测定,欲使吸光度为。问需称样多少克(已知:该药物在 310nm处摩尔吸收系数=6130L/molcm,摩尔质量M=),加水准确稀释至1000mL,将此溶液置厚度为1cm的吸收池中,在λ=361nm处测得A=。另取两个试样,一为VB12的原料药,精密称取mg,加水准确稀释至1000mL,同样条件下测得A=,另一为VB12注射液,精密吸取mL,稀释至mL,同样条件下测得A=。试分别计算VB12原料药的百分质量分数和注射液的浓度。,利用加入过量的有色的显色剂形成有色络合物,并在 575nm处测量吸光度。若溶液中有色络合物的浓度为-5-4×10mol/l,游离试剂的浓度为×10mol/l测得吸光度为:在同一波长下,仅含 ×10-4mol/l游离试剂的溶液,其吸光度只有,所有测量都在吸收池和以水作空白下进行,计算在 575nm时,(1)游离试剂的摩尔吸光系数;(2)有色络合物的摩尔吸光系数。、B两种药物组成的复方制剂溶液。在 1cm吸收池中,分别以295nm和370nm的波长进行吸光度测定,测得吸光度分别为和。浓度为 mol/L的A对照品溶液,在1cm的吸收池中,波长为295nm和370nm处,测得吸收度分别为和;同样条件,浓度为mol/L的B对照品溶液测得吸收度分别为和。计算复方制剂中A和B的浓度(假设复方制剂其他试剂不干扰测定)。,用等厚度的吸收池测得吸光度如下表。(1)求被测混合物中A和B含量。(2)求被测混合物在300nm处的吸光度。波长 238nm 282nm 300nmA对照μg/mLB对照μg/mLA+B样品 —,在入射光2中混入杂散光1。1和2组成强度比为Iλ1Iλ2,吸光化合物在ελ=103L/molcm,在ελ=104L/molcm。用2cm0:0=1:51处的12处的2吸收池进行吸光度测定。(1)若吸光物质浓度为510-6mol/L,计算其理论吸光度A;(2)若浓度为110-5mol/L,A又为多少该吸光物溶液是否服从朗伯特- cm厚的吸收池中测得透光度为 %,仪器的透光度读数 T有%的绝对误差。试问:(1)测定结果的相对误差是多少( 2)欲使测量的相对误差为最小,溶液的浓度应稀释多少倍( 3)若浓度不变,问应用多厚的吸收池较合适( 4)浓度或吸收池厚度改变后,,其酸式(HA)吸收420nm的光,摩尔吸光系数为325L/molcm。其碱式(A—)吸收600nm的光,摩尔吸光系数为120L/molcm。HA在600nm处无吸收,A—在420nm处无吸收。现有该指示剂的水溶液,用1cm比色皿,在420nm处测得吸光度为,在600nm处吸光度为。若指示剂的pKa为,计算该水溶液的pH值。,ε=×104L/molcm,而它的共轭碱在此波长下无吸收,在pH=的缓冲溶液中,浓度为×10-5mol/L的该弱酸溶液在475nm处的吸光度为(用1cm比色杯)。计算此弱酸的Ka值。-4mol/L。于520nm处,用1cm比色皿测定,在不同pH值的缓冲溶液中,测得吸光度值如下:pHA求:(1)在520nm处,HA和A—的HA,A-;(2)HA的电离常数Ka。(此条件时, Ni及B无吸收),当络合剂2+2+2+的稳浓度比Ni过量5倍时,Ni完全形成络合物。根据下列数据,求Ni+2B=NiB22定常数K。溶液组成及浓度吸光度(mol/L)(λ=395nm)2+-4×-1Ni×10)),B102+×10-4×-3)Ni),B10****题答案与解析一、选择题(其中 1~12题为单选,13~21题为多选)。苯环可产生B吸收带和E吸收带,羰基可产生R吸收带。羰基和苯环共轭B带、E带和R带都发生红移,同时吸收增强。共轭后的E带也可称之为K带。所以四种化合物中只有苯乙***能同时产生B吸收带、K吸收和R吸收带。。在紫外光谱中,双键发生共轭后,轨道进行重新整合,轨道的最高成键轨道()能量升高,轨道的最低反键轨道( *)能量降低,使*跃迁所需能量减小。双键共轭越大,*跃迁所需能量越小,吸收波长发生红移。四种化合物中, 1,3丁二烯,1,3环已二烯,2,3二***1,3丁二烯都含有共轭体系, *跃迁所需能量减小。因此, *跃迁所需能量最大的化合物是 1,4戊二烯。。Lambert-Beer定律描述的是在一定条件下,当一束平行的单色光通过均匀的非散射样品时,样品对光的吸光度与样品浓度及液层厚度成正比。 符合Lambert-Beer定律的有色溶液稀释时,吸光物质的吸光度降低,但最大吸收峰波长位置即 max不变。。单波长分光光度计方框图:光源 单色器 吸收池 检测器 显示器双波长分光光度计方框图:。。由双波长分光光度计方框图可知:光源发出的复光交替通过单色器 1和单色器2,得到测定波长 2和参比波长 1,测定波长 2和参比波长 1交替通过吸收池并通过检测器检测,使得干扰组分 A在测定波长2和参比波长1下有:A A2 A1 A2A A1A 0使得测定组分B在2和1有:A A2 A1 A2B A1B (E2B E1B)cBl因此,双波长分光光度计的输出信号是样品在测定波长的吸收与参比波长的吸收之差(设A和B的吸收光谱有等吸收点)。。在配制被测组分分光光度法测定溶液时,常加入的反应试剂、缓冲溶液、溶剂等都可能对入射光产生吸收,因为物质对光的吸收具有加和性。因此,在紫外 -可见分光光度法测定中,必须选择一种合适的溶液作为参比溶液,以消除试剂等非测定物质对入射光吸收的影响。。K2Cr2O7硫酸溶液的配制的一般操作过程:称取固体 K2Cr2O7一定量,于小烧杯中,用一定浓度的硫酸溶液溶解,待K2Cr2O7完全溶解后,转移至一定体积的容量瓶中,用硫酸溶液稀释至刻度,配制成适宜浓度的K2Cr2O7硫酸溶液。由此可见:溶液的配制过程只加入了硫酸溶液,因此,扫描 K2Cr2O7硫酸溶液的紫外-可见吸收光谱时,参比溶液选用H2SO4溶液即可。。在比色法中,显色反应的显色剂选择原则是:(1)被测物与生成的有色物有确定的定量关系;(2)生成的有色物应有足够的稳定性;(3)显色反应产物和显色剂吸收峰的位置应有显着的差别或在同一光波下的值相差足够大; (4)显色反应产物的足够大;(5)显色反应的选择性要高。因此,显色反应的显色剂选择原则不正确的是显色剂的值愈大愈好。。在光度法测定前,为了保证入射光强度完全被待测物质所吸收,需用参比溶液调节仪器吸光度A=0或透光率T=100%,如果透光率只调至了%,满量程为T=0%~%,而不是T=0%~100%。在光度法测定前,如果透光率只调至%,测得某有色溶液的透光率为%,此时溶液的真正透光率为:100%0%x100%95%0%%%%95%。该法是通过氧化还原反应用分光光度法间接测定 KCl中的微量I-。在测定中一切可吸光的物质或影响氧化还原反应的物质均应在测定中扣除, 扣除的办法就是选择合适的参比溶液,该法选择的参比溶液应包括除 I-以外所有与样品相同的酸、 KMnO4及淀粉,称为试剂空白。。一般分光光度计有 5部分组成:光源、单色器、吸收池、检测器和显示器。其中单色器是将连续光按波长顺序色散,并从中分离出一定宽度的波带的装置。单色光的组件主要包括光栅或棱镜、狭缝。。物质的吸光系数不仅与物质的结构有关,而且与测定波长有关。因为物质对光的吸收具有选择性,同一物质在不同波长光下测定吸收能力不同,吸光系数不同。。根据:0434T求得:(%)%(-):A正确,可不经分离,在A组分吸收最大的波长处和B吸收最大的波长处分别测定 A和B;D正确,B组分吸收最大的波长处测得的吸光度值不包括A的吸收。。A错,在LambertBeer定律中,c-T之间没有线性关系;B正确,参比溶液(即试剂空白)的干扰属于系统误差。若不使用参比溶液调节 A=0,就等于没有消除方法的系统误差,这时标准曲线不通过原点; C正确,若假设参比溶液中仅有一种吸光物质,有关系式:A (E样c样 E参c参)l